酶工程考试复习题.doc

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1、1.酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。3.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶4.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。5.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶6.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶7定向进化：是模拟自然进化的过程，进行人工随机突变

2、，并在特定的环境下进行选择，使进化朝着人们所需方向发展的技术过程。8模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。9酶反应器：是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置，他为酶促反应提供合适的场所和最佳的反应条件，使底物最大限度的转化为物。10稳定pH：酶在一定的pH范围之内是稳定的，超过这个限度易变性失活，这样的pH范围为此酶的稳定pH11产酶动力学：主要研究细胞产酶速率及各种因素对产酶速率的影响，包括宏观产酶动力学和微观产酶动力学。12凝胶过滤：又叫分子排阻层析，分子筛层析，在层析柱中填充分子筛，加入待纯化样品再用适当缓

3、冲液淋洗，样品中的分子经过一定距离的层析柱后，按分子大小先后顺序流出的，彼此分开的层析方法。13酶原：指有些酶在细胞内合成及初分泌时是没有活性的前体14原生质体：除去细胞壁的植物细胞或微生物细胞15酶分子的修饰：通过各种方法改变酶的结构进而改变酶的性质、功能，使其具有催化活性的技术工程16核酶：一类具有催化活性的RNA分子17端粒：是存在于真核细胞线状染色体末端的一小段DNA-蛋白质复合体18酶的非水相催化：酶在非水介质中的催化作用19转录：是遗传信息从DNA流向RNA的过程。20细胞活化：保藏的菌种在使用之前，必须接种于新鲜的斜面培养基上，在一定条件下进行培养

4、，以恢复细胞的生命活动21萃取分离：利用组分在两种不同的互不相溶的溶剂中溶解度不同而分离的技术22层析分离：利用混合物中各组分的物理化学性质的不同，使各组分在两相中的分布程度不同而达到分离23吸附层析：利用吸附剂对不同物质的吸附力不同，而使混合液中的组分分离的方法⒈影响酶催化反应因素：底物浓度、酶浓度、温度、pH、激活剂、抑制剂⒉酶的催化特点：专一、高效、反应条件温和、可调控性⒊蛋白酶分类：氧化还原酶类、还原酶类、水解酶类、裂合酶类、异构物酶类、合成酶类⒋终止酶活的方法：1物理法：①沸水浴中终止反应②置于恒温冰箱中2化学法：①加入酸或碱，使远离反应最适pH②加入

5、酸变性剂⒌酶生产的方法：①提取分离法②生物合成法③化学合成法⒍产酶微生物的种类：细菌、放线菌、酵母菌、霉菌⒎产酶微生物的来源：土壤、空气、水、极端环境⒏调节溶氧速率的方法：调节通气量、调节氧分压、调节气液接触时间、调节气液接触面积⒐提高产酶量的措施：①添加诱导物②控制阻遏物浓度③添加表面活性剂④添加产酶促进剂⒑细胞破碎方法：1机械破碎法：①机械捣碎②研磨③匀浆2物理破碎法：①温度差②压力破碎法：突然降压法、高温冲击法、渗透压法③超声波破碎法3化学破碎法：有机溶剂、表面活性剂4酶破碎法：外加酶破碎法、自溶法⒒1溶菌酶：革兰氏阳性菌2几丁质酶：霉菌3溶菌酶，EDTA

6、：革兰氏阴性菌4纤维素酶，半纤维丝酶，果胶酶：植物细胞⒓酶的提取方法：①盐溶法②酸溶液提取③碱溶液提取④有机溶剂提取⒔酶提取注意事项：①温度:0~10℃或37℃以上②pH：溶液的pH应远离酶的等电点③提取液的体积：为酶原料体积的3~5倍④添加保护剂：抗氧化剂⒕离心分离方法：①差速离心②密度梯度离心（蔗糖）③等密度梯度离心⒖沉淀分离方法：①盐析沉淀法②有机溶剂沉淀法③等电点沉淀法④复合沉淀法⑤选择性沉淀法⒗过滤分为：1粗虑2微滤3超滤4反渗透。1、粗虑分为：加压过滤、减压过滤、常压过滤。2、膜分离分为：加压膜分离、扩散膜分离、电场膜分离⒘PEG作用：①原生质体制备

7、②沉淀分离蛋白③双水相萃取体系用于提取酶④酶的浓缩⑤酶的化学修饰⒙萃取分离的分类：①有机溶剂萃取②双水相萃取③超临界萃取④反胶束萃取⒚层析分离分类：吸附层析、凝胶层析、离子交换层析⒛吸附层析洗脱方法：⑴溶剂洗脱法⑵置换洗脱法⑶前缘洗脱法21.酶的浓缩与结晶：1结晶方法：有机溶剂法、透析平衡结晶法、等电点结晶法2浓缩方法：蒸发、反复冻融浓缩、PEG浓缩22.固定化酶的固定方法：①载体结合法②交联法③包埋法23.固定化酶的特性：⑴稳定性⑵最适温度提高⑶最适pH⑷酶的动力学特征⑸底物特异性24.原生质体的制备步骤：对数期生长的细胞―›高渗缓冲液―›细胞壁水解酶―›分离

8、除去细胞壁碎片―›原生质