现代酶工程复习题.doc

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1、现代酶工程习题第一章  绪论1.酶工程的概念、分类及其研究内容。2.Payen和Person、Buchner兄弟、Sumner、Fisher、Koshland、Henri、Michaelis和Menten、Jacob和Monod、Cech和Altmam及千佃一郎对酶工程学的发展做出的主要贡献是什么？第二章酶工程基础1、酶的命名EC1.1.1.1代表一种什么酶类？P92、酶的化学本质？P153、氨基酸残基的类型？什么是酶的必需基团？什么是酶的活性中心？P164、酶的催化反应特点？P315、酶催化反应的作用机制？P356、什么是平衡态假说和拟稳态假说？要求会推导方程。7、米氏常数Km的含义？

2、P458、画出并简述从菠萝皮中提取蛋白酶的工艺及原理？P219、分析影响微生物产酶量生产工艺方面的因素及常用控制方法？（若结合到中性蛋白酶的生产，参数及方法需具体化）10、酶生物合成方面的因素有哪些？具体到酸性蛋白酶的生产，分析提高产酶量可能的措施？11、酶分离纯化方法有哪些？分离纯化时注意事项？酶分离纯化的一般步骤？酶为什么要分离纯化？12、列举酶在淀粉类食品、蛋白类食品及果蔬类食品方面的应用？简述酶的应用对食品科学的发展意义？13、什么是酶固定化？固定化酶优点？固定化酶方法？P6614、固定化对酶活性及酶反应系统的影响的原因？15葡萄糖在葡萄糖异构酶存在时转化为果糖的反应机理为:试分

3、别用如下不同方法推导出反应速率方程：（ⅰ）平衡态近似法；（ⅱ）拟稳态近似法。第四章酶反应器的设计和放大1、画出分批搅拌罐式反应器和连续搅拌罐式反应器的示意图，说明它们在操作上的异同？2、什么是反应器放大？有哪些放大方法？3、影响酶反应器操作的因素有哪些？如何确定及控制这些因素？第五章酶的分子修饰与改造1、什么是酶的分子修饰？主要方法有哪些？2、为什么要对酶分子进行修饰？举例说明。第七章核酶与脱氧核酶（不要求）第八章抗体酶1、什么是抗体酶？2、将抗体转变为酶的主要途径有哪些？1946年，鲍林(Pauling)用过渡态理论阐明了酶催化的实质，即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化

4、学反应的过渡态(底物激态)，从而降低反应能级。1969年杰奈克斯(Jencks)在过渡态理论的基础上猜想：若抗体能结合反应的过渡态，理论上它则能够获得催化性质。1984年列那(Lerner)进一步推测：以过渡态类似物作为半抗原，则其诱发出的抗体即与该类似物有着互补的构象，这种抗体与底物结合后，即可诱导底物进入过渡态构象，从而引起催化作用。根据这个猜想列那和苏尔滋(P．C．Schultz)分别领导各自的研究小组独立地证明了：针对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体，能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。1986年美国Science杂志同时发表了他们的发现，并将这类具催化能力的免疫球蛋白称为抗

5、体酶或催化抗体。　　抗体酶具有典型的酶反应特性；与配体(底物)结合的专一性，包括立体专一性，抗体酶催化反应的专一性可以达到甚至超过天然酶的专一性；具有高效催化性，一般抗体酶催化反应速度比非催化反应快104～108倍，有的反应速度已接近于天然酶促反应速度；抗体酶还具有与天然酶相近的米氏方程动力学及pH依赖性等。　　将抗体转变为酶主要通过诱导法、引入法、拷贝法三种途径。诱导法是利用反应过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体，筛选出具高催化活性的单抗即抗体酶；引入法则借助基因工程和蛋白质工程将催化基因引入到特异抗体的抗原结合位点上，使其获得催化功能，拷贝法主要根据抗体生成过程中抗原-抗体互补性来设

6、计的。博莱克(Pollack)等以硝基苯酚磷酸胆碱酯作为半抗原诱导产生单抗，经筛选找到加快水解反应1.2万倍的抗体酶。第九章模拟酶1、什么是模拟酶？2、模拟酶可以分为哪些类型？3、分子印迹酶？P164第十章非水介质中的酶催化反应有机介质反应体系的主要类型？P179答案：11、（一）酶为什么要分离纯化①、抑制或利用酶需要知道酶的性质，而研究酶需要一定纯度的酶；②、研究酶的结构、底物特异性或动力学参数需要纯酶；③、酶应用时尤其是用于药物时，需要高纯酶，否则易引起过敏等不良反应。（二）、酶的分离纯化方法如下：依据的性质分离方法适用规模分子大小或质量离心、凝胶过滤透析、超滤大/小小小电荷离子交换

7、色谱电泳等电聚焦大/小小小溶解度等电点法（改变pH）盐析（改变I）有机溶剂沉淀大/小大大特殊结合性质亲和色谱亲和洗脱小大/小（三）分离纯化时注意事项。①低温进行，保持酶活；②保持一定的pH值。过酸过碱都易引起酶失活，提取时应远离pI，沉淀分离时接近pI；③过程应尽可能快速进行；④设法抑制酶活，以防酶之间的相互作用；⑤注意前后两个方法的相容性。透析、凝胶、过滤使样品变稀，紧接着应采用浓缩效果较好的分离方法；⑥在酶的分离纯化过程中，不宜