干细胞文献综述.pdf

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1、.几种干细胞的研究进展(文献综述)朱芳芳09级生科2班40908104【摘要】干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类:全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称为“万用细胞”。由于干细胞具有可塑性,可用于治疗各种外伤、病理损伤、组织缺陷性疾病、免疫缺陷性疾病和遗传疾病等,可用于各种医学实验,几乎涉及所有医学范畴,具有广阔发展前景。【关键词】胰腺干

2、细胞人胚胎干细胞神经干细胞细胞培养临床应用20世纪是生命科学发展最为迅猛的时代,它已成为自然科学中最引人注目的领域。1998年美国两个实验室分别报告了人胚胎干细胞(embryonicstemcell,ES细胞)和胚胎生殖细胞(embryonicgermcell,EG细胞)建系成功。ES细胞是人体内最原始的细胞,它具有较强的再生能力,在干细胞因子和多种白细胞介素的联合作用下可扩增出各类细胞,分离、保存并在体外人工大量培养使之成为各种组织和【1、2】器官已成为干细胞研究的首要课题。..1.胰腺干细胞的研究及发展1.1人类胰腺干细胞的分化和起源对人类而

3、言,胚胎胰腺的发育起源于内胚层两个的原基背侧和腹侧原基,背侧的原基是由前肠膨部分化而成,于胚胎第26天出现;腹侧的原基则由胆十二指肠原基的胆管凸部分化而成,在28~31天出现;41天以后,较大的背侧和腹侧原基渐渐融合生长,形成胰腺的雏形,逐渐发育为分泌导管及沿其排列的腺泡及管道,其后腹侧原基形成成型胰腺的胰头(包括钩突),【3】背侧原基则发育为胰体和胰尾。1.2胰腺胚胎干细胞的分离和培养目前对于胰腺胚胎干细胞的分离培养,主要有酶消化法、悬浮培养法和气液界面培养法等。但最常用和效果较好的为酶消化法,它获取的细胞数比其他的方法要多,而且对细胞的破坏较

4、小。将获取的胚胎胰腺组织剪成小块,用胶原酶A消化分离30~60分钟(于37℃)后,用Hanks液冲洗几次(于4℃),再经过高速离心,即可获取胰腺上皮细胞,将之置于培养基中进行培【4】养扩增。1.3胰腺胚胎干细胞的展望胰腺干细胞的巨大潜能,为临床上治疗糖尿病展示了一个美好的前景,但仍需充分了解胰腺干细胞的特性,关键环节在于突破胰腺干细胞的标志物,它是了解细胞生物学的通道。胰腺干细胞作为供移植替换受损的胰岛组织的能力是无限的,但在临床运用前如何控制其定向分化、基因修饰和选择、提纯等是广泛开展的重要前提;另在临床运用后如何防止移植的干细胞形成胚胎组织瘤

5、,也是需进一步研讨的内容。总之,胰腺干细胞对人类发育生..物学的基础研究和临床医学都具有相当重要的意义,如果一旦攻克胰腺干细胞这个难题,将会在内分泌界及糖尿病的治疗上产生一次【4】重大革命。2.胚胎干细胞的研究及发展2.1人类胚胎干细胞的来源主要有:(1)从人类胚胎的囊胚期内细胞群中直接分离多能干细胞1;(2)从终止妊娠的胎儿组织中分离出多能干细胞2;(3)体细胞核转移。2.2人胚胎干细胞系的建立1989年Prea尝试从人畸胎瘤分离ES细胞,初步证明了人ES细胞系建立的可能性。1998年Thomson领导的小组将合法获得的体外受精的人早期胚胎在体

6、外培养至囊胚期,利用免疫外科手术去除透明带,以抗BeWO细胞的单抗作免疫标记,剔除外层细胞,以35Gyγ射线照射小鼠胚胎成纤维细胞作饲养层,以DMEM+胎牛血清+谷氨酰胺+巯基乙醇+非必需氨基酸作为培养液,体外培养人囊胚内细胞群,9~15d后将长出的细胞团吹散或者用胰酶或EDTA消化,然后继续在小鼠滋养层细胞上生长,挑选具有均一的未分化形态的单克隆细胞团,吹散成50~100个细胞的小团后再行培养,如此重复直至成系。2.3人类胚胎干细胞的应用前景(1)细胞、组织修复和移植治疗:这里胚胎干细胞的定向分化是关键,还要解决有关免疫学障碍问题或直接应用核移

7、植工程来制备带有患者自己基因组的ES细胞;(2)基因治疗:这将涉及干细胞的转基因操作和适当分化载体细胞的选择,通过基因打靶、突变和转基因等技术制作各种实验模型,研究发育、肿瘤、..免疫以及人类遗传病的有关问题;(3)药物毒理试验:ES/EBs及其分化细胞都可作为有关药物的针对性筛选系统。能:许多细胞谱系分化【5】中的调控因子就是通过这种手段证明的。3.神经干细胞研究的研究及发展3.1神经干细胞的分布及培养神经管形成以前,在整个神经板检测到神经干细胞的选择性标记物神经巢蛋白(nestin),是细胞的【6】骨架蛋白。构成小鼠神经板的细胞,具有高效形成

8、神经球的能力。但目前尚不能肯定神经板与神经干细胞是否具有相同的诱导机制。神经管形成后,神经干细胞位于神经管的脑室壁周边。关于成脑神经干细

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