第一章植物组织培养实验室ppt课件.ppt

《第一章植物组织培养实验室ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第三节植物组织培养基本操作目的与要求了解植物组织培养的培养基种类、成分及其特点，学习植物组织培养基本操作，了解离体培养环境条件，以及炼苗移栽基本方法。具有植物组织培养基本操作程序的认知。能够识别各类培养基特点，熟悉MS培养基成分；具有制作培养基能力，具有选择外植体、表面灭菌、无菌接种等基本能力；具有植物组织培养条件控制基本能力；有进行组培苗驯化练苗的基本能力。第一节培养基成分、种类及特点第二节培养基的制备第三节外植体无菌接种第四节外植体培养第五节试管苗的驯化与移栽第一节 培养基成分、种类及特点植物生长必需

2、16种基本元素：N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、Mn、B、Cu、Zn、Mo、Cl、C、H、O。离体培养条件下，各元素主要从培养基中获得：H和O来源于水，C来源于添加的糖类，其它矿质元素来源于组成培养基的无机盐。培养基是根据植物生长所需营养成分，配制成的供植物生长的人工制作的营养物质。一、培养基的成分培养基一般包括无机盐、有机化合物和生长调节剂三大基本组成成分。1、无机盐类功能:离体组织生长发育的基本成分根据植物对必需元素需要的量，可以分为以下两类：大量元素—植物所需元素的使用量一般在每升几十-几千毫克，

3、有C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S。微量元素—植物所需元素的浓度小于10-5～10-7mol/L，Fe、Cu、Zn、Mn、Mo、B、Cl。除C、H、O外，其它矿质元素通常以离子态吸收N-硝态氮和铵态氮2、有机化合物培养基中只有无机盐叫做基本培养基，为使培养物更好的生长，还需添加有机成分，常用有糖类、维生素、醇类、嘌呤、氨基酸等。⑴糖类功能离体培养物生长与发育不可缺少的有机成分，即作为碳源，又维持培养基的渗透压在1.5-4.1MPa。多使用蔗糖，试管苗生长与繁殖浓度2-3%，幼胚培养4-6%，某些特殊

4、培养中用8-10%。细胞和原生质体培养还用麦芽糖、葡萄糖、果糖。⑵维生素类功能参与酶的形成、蛋白质、脂肪代谢，明显的促进离体培养物的生长。盐酸硫胺素-VB1、盐酸吡哆醇-VB6、烟酸-Vpp、生物素-VH、维生素C-Vc。⑶肌醇功能促进糖的转化、维生素和激素的利用，对胚状体和芽的形成有良好影响。用量一般50-100mg/L。⑷腺嘌呤合成各种细胞分裂素的前体物质之一，利于细胞分裂，促进芽的形成和生长。⑸氨基酸蛋白质的成分，是有机氮化合物，常用甘氨酸和多种氨基酸混合物如水解酪蛋白、水解乳蛋白。⑹其它复合成分成

5、分尚不清楚的天然提取物，如椰乳、香蕉汁、酵母提取液、番茄汁、麦芽糖等。3、生长调节物质⑴生长素类功能促进细胞脱分化和细胞伸长，诱导愈伤组织产生生长素与细胞分裂素协调作用，在离体培养中，生长素促进根的形成，抑制芽的形成。液体培养中利于体细胞胚胎发生。常用IAA、IBA、NAA、2,4-D。IBA促进生根细胞分裂素的生理效应⑵细胞分裂素类功能促进细胞分裂和扩大，调节器官分化，延缓组织衰老，增强蛋白质合成。离体培养中，促进不定芽的发生，与生长素协调作用可有效控制培养物的生长与分化。常用6-BA、ZT、KT、2i

6、P。植株的形态建成是CTK和IAA的比值调控的CTK/IAA高，诱导愈伤组织形成芽CTK/IAA低，诱导愈伤组织形成根烟草在不同细胞分裂素与生长素浓度下的生理效应⑶赤霉素类功能促进细胞伸长生长、诱导花芽形成、打破种子休眠以及诱导单性结实等。与生长素协调作用对形成层分化有影响，刺激体细胞胚进一步发育成植株。有20多种，目前主要是赤霉酸GA3。4、水离体培养中，既是培养基营养成分的溶剂，又是培养基的重要组成部分，占培养基成分的95%。原生质体培养、细胞培养及分生组织培养一般应用双蒸水或超纯水大批量快速繁殖培养

7、，可用一般蒸馏水或纯净水。5、其它附加成分⑴琼脂功能来自海藻的多糖类物质，组织培养中最常用作凝固剂，是最方便、最好的凝固剂和支持物。常用量0.6%-1.0%，不是培养基必需成分。卡拉胶海藻提取物，含杂质少纯度更高，凝固后培养基透明，利于材料观察。⑵活性炭功能常用的吸附剂，某些培养类型中，可以吸附培养过程中产生的一些有毒物质（酚类物质），有利于培养物的生长。常用浓度1～5mg/L左右其吸附作用选择性较差，使用应慎重。常受温度影响，低温吸附效果好，高温吸附能力降低甚至解吸附。⑶抗生素培养基中添加抗生素可防止菌

8、类污染，常用的抗生素有青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量一般为5～20mg/L。大部分抗生素需要过滤除菌。⑷抗氧化物抗酚类氧化常用的药剂有半胱氨酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）及抗坏血酸（Vc），可用50～200mg／L的浓度洗涤刚切割的外植体伤口表面，或过滤除菌后加入固体培养基的表层。二、常用培养基的种类、配方及特点（一）培养基种类1、根据态相分：固体培养基-加凝固剂的培养基液体培养基-不加凝固剂的培养基。2、根据培养过程分：初代