血液分析仪及其临床应用课件.ppt

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1、血液分析仪及其临床应用血液分析仪（hematologyanalyzer,HA）：临床血液一般检查最常用仪器。50年代，美国库尔特（W.H.Coulter）发明电子血细胞计数仪并申请专利。血液分析仪优势：检测项目多速度快精度高易操作一、检测原理检测功能：细胞计数功能细胞分类功能检测原理分为2类：（一）电阻抗法1.电阻抗原理(principleofelectricalimpedance)，又称库尔特原理（Coulterprinciple）Couler计数原理孔电流真空内电极外电极-+血细胞悬液标本杯2.计数部件结构组成等渗电解质溶液细胞

2、悬液小孔管（传感器transducer）宝石孔（直径<100μm，厚度约75μm）脉冲数量和大小反映细胞：数量体积大小3.白细胞计数和分类计数原理仪器将体积为35～450fL的血细胞，分为256个通道（channel）。每个通道：1.64fl根据细胞大小，分别置于不同的通道中，显示血细胞体积分布直方图（Histogram）。经溶血素处理脱水后，血细胞体积大小发生了变化！！！第一群（35～90fl）小细胞区：淋巴细胞（体积最小）：一般在35～90fl。第二群（90～160fl）是单个核细胞区，（中间细胞）：单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱

3、性粒细胞、原始、幼稚细胞、异常细胞等第三群（160fl以上）大细胞区：嗜中性粒细胞（体积最大）：一般在135-350fl三分群血液分析仪正常白细胞分类模式图（直方图）3590160300400450(fl)%仪器组成：①信号发生器②放大器③阈值调节④甄别器⑤整形器⑥计数系统2.电阻抗法红细胞检测原理（1）红细胞计数和血细胞比容测定与白细胞计数相似。(%)100200300400(fl)(2)血红蛋白测定：血红蛋白与溶血剂中的特定试剂结合形成一种血红蛋白衍生物，在530～550nm下进行比色。ICSH推荐用氰化高铁法（540nm比色）

4、。非氰化溶血剂，如SDS-Hb。(3)红细胞其他参数检测3.电阻抗法血小板检测原理血小板计数（platelet,PLT）：随红细胞在一个系统中进行检测。直方图在2～28fl（不同仪器不一）。血小板平均体积（meanplateletvolume,MPV）。102030(fl)%（二）光散射法血液分析仪检测原理组合应用电学光学细胞化学等细胞流电学和光学检测图（AcT5diff）光散射法白细胞检测原理类别（1）激光与细胞化学法1）过氧化物酶检测通道：嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞过氧化物酶活性比单核细胞强淋巴细胞、嗜碱粒细胞无过氧化物酶活性。

5、散射图定位：X轴为吸光率（酶反应强度）、Y轴为光散射（细胞大小）显示检测结果。2）嗜碱性粒细胞/分叶核检测通道。（2）容量、电导、光散射（volume，conductivity，scatter,VCS）法：血细胞未经任何处理，保持与体内完全相同状态下进行。VCS法检测原理细胞体积技术（测量细胞大小）电导性技术（测量细胞内部结构）光散射（scatter,S）技术（测量细胞形态、细胞核和细胞颗粒）。体积电导光散射VCS可显示3种细胞散点图DF1（体积值和散射光值）DF2（体积值和电导值）DF3（体积值和电导值）：只显示basophil细

6、胞流电学和光学散点图（AcT5diff）VCS血液分析仪正常白细胞散点图实例（3）电阻抗与射频法（能透入细胞内，测量核的大小及颗粒的多少）：①嗜酸性粒细胞检测系统②嗜碱性粒细胞检测系统③5种白细胞分类检测系统：直流电（directcurrent，DC）为横坐标，以射频（radiofrequency，RF）为纵坐标。④幼稚细胞检测系统：幼稚细胞膜脂质较成熟细胞少。加入硫化氨基酸，与幼稚细胞的结合量多于较成熟的细胞幼稚细胞对溶血剂有抵抗作用，从而提供幼稚髓细胞信息（immaturemyeloidinformation，IMI）。（4）多

7、角度偏振光散射（multi-anglepolarizedscatterseparationofwhitecell,MAPSS）法①0°：前角光散射（1°～3°），可粗略测定细胞大小。②10°：狭角光散射（7°～11°），可测定细胞内部结构相对特征。③90°：垂直光散射（70°～110°），测定细胞核分叶情况。④90°：消偏振光散射（70°～110°），区分嗜酸性粒细胞与其他细胞。2.光散射法红细胞检测原理低角度(2°～3°)：测量红细胞体积高角度(5°～15°)：测定红细胞血红蛋白浓度得到MCV、MCH、MCHC测定值，计算出RDW

8、、红细胞血红蛋白分布宽度（redbloodcellhemoglobindistributionwidth，HDW）3.光散射法血小板检测原理Mie理论（Mietheoryoflightscatterforhomogeneoussphe