异氟醚吸入麻醉对老龄大鼠海马pERK12表达的影响.pdf

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1、包头医学院学报2010年第26卷第6期32JOURNALOFBAOTOU【EDICALCoLLEGEVoL26No．62010异氟醚吸入麻醉对老龄大鼠海马pERK1／2表达的影响王静赵志英方刚霍东升(包头医学院，内蒙古包头014060)摘要目的：检测相同浓度不同维持时间异氟醚吸入全身麻醉对老龄大鼠海马pERK1／2表达的影响，研究老龄大鼠异氟醚麻醉后认知功能变化的机理，以期更好地阐明麻醉后认知功能障碍的发生机制。方法：将6O只老龄Wistar大鼠，随机分为A、B、C和D组，每组15只。A组为正常对照组，B、C、D组以异氟醚3％浓度诱导，待翻正反射消失后再以1．5％浓度分别维持0．5、

2、1、2h，待麻醉结束后任其自然苏醒。麻醉结束后24h，应用Morris水迷宫对A、B、C、D四组大鼠开始连续5天的行为学观察，在第三天和第五天从四组中各取5只老龄大鼠取脑组织切片进行磷酸化ERK1／2(pERK)的免疫组织化学染色，观察和分析异氟醚麻醉分别维持0．5、1、2h与pERK表达的关系。结果：第三天B、c、D组大鼠海马CA1区pERK表达(IOD值)均低于第五天(P<0．01)，同一时间点各诱导组也比对照组低(P<0．05)。结论：吸入全麻药异氟醚可以引起大鼠脑内海马CA1区的pERK明显减弱，并且这种改变与动物的麻醉时间长短之间存在着高度的一致性，麻醉时间越长，pERK表

3、达越低，提示这些脑区内ERK1／2磷酸化与全麻的产生或效应之间可能有密切的关系。关键词异氟醚；老龄大鼠；水迷宫；丝裂原活化蛋白激酶；pERK1／2随着老龄人口数量及所占社会人口比重的日益增氟醚吸入全身麻醉对老龄大鼠空间学习记忆能力的影加，接受手术的老年患者比例必然也随之增加，然而老响，观察老龄大鼠异氟醚麻醉后，记忆相关脑区pERK年患者术后常出现中枢神经系统的并发症，表现为精神的表达变化。研究老龄大鼠异氟醚麻醉后认知功能变错乱、焦虑、性格的改变及记忆受损。这种手术后性格、化的机理，以期更好地阐明麻醉后认知功能障碍的发生社交能力及认知能力和技巧的变化称为术后认知功能机制。障碍(Post

4、operativeCognitiveDysfunction，POCD)。1对象与方法POCD是老年患者术后常见的麻醉并发症。对于一些1．1对象老龄雄性Wistar大鼠，由内蒙古大学动物患者，短暂的(数周至数月)认知功能损害仅会带来一些实验中心提供(实验动物机构许可证号：SCXK(蒙)烦恼，而持久的损害则会使患者丧失工作能力，使老年2002—0001)，体重400～650g。实验过程中对动物的患者丧失独立能力，并可能带来灾难性后果。研究发现处置符合2006年科技部《关于善待实验动物的指导性丝裂原活化蛋白激酶(mltogen—activatedproteinkinase，意见》的规定。M

5、APK)家族的细胞外信号调节激酶(extraeellularsignal1．2实验方法把6O只老龄Wismr大鼠随机分为—regulatedkinase1／2，ERK1／2)信号通路是目前了解A组、B组、C组和D组，每组各15只。A组为正常对较多的信号转导通路。现代研究认为其功能与调控细照组，B、C、D组以异氟醚3％浓度诱导，待翻正反射消失后再以1．5％浓度分别维持0．5、1、2h，待麻醉结胞的增殖分化、凋亡，神经的损伤与修复，脑内神经元长时程增强(LTP)的形成以及认知学习等密切相关J。束后任其自然苏醒。近年来发现，ERK1／2分子在多种应激条件下会快速被1．2．1异氟醚吸入全身麻

6、醉动物模型的建立常用异氟醚大鼠麻醉的方法有三种：(1)应用较高浓度异激活(磷酸化)，且磷酸化的ERK1／2(pERK1／2)可以用氟醚(>3％)吸人麻醉诱导，然后行气管内插管或气免疫细胞化学法在脑切片原位显示出来。已有一些研管切开，在所需浓度麻醉维持下机械通气；(2)应用较究者观察了MAPK／ERK通路在局麻药作用机制及其毒高浓度异氟醚(>3％)吸入麻醉诱导，以面罩形式行性中的作用】。本研究拟采用Morris水迷宫行为学检全麻维持并行辅助机械通气；(3)在麻醉机回路中放测和免疫组织化学染色，检测相同浓度不同维持时间异置适当大小的麻醉箱，调节箱内异氟醚浓度并保留大鼠自主呼吸。本实验之所

7、以选用第三种方法，是因为通讯作者：赵志荚此方法简便易行，适合于低浓度异氟醚吸人全身麻醉，第6期王静，等．异氟醚吸入麻醉对老龄大鼠海马pERK1／2表达的影响33符合本实验要求，且麻醉过程中不会引起大鼠生命体各诱导组也比对照组低(P<0．05)。详见表1。征的变化，麻醉结束后大鼠苏醒迅速完善。表1异氟醚对四组大鼠海马CA1区B、C、D三组大鼠置于自制的麻醉箱中，该麻醉箱pERK1／2表达影响(±s)连接于Ohmeda7100型麻醉呼吸机螺纹管回路中，麻醉呼吸