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时间:2020-08-11
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1、实验三、薄层层析薄层色谱又叫薄板层析,是色谱法中的一种,是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术。一、实验目的1、了解色谱法分离提纯有机化合物的基本原理和应用。2、掌握薄层层析的操作技术。二、实验原理色谱法的基本原理是利混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能(分配)的不同,或其亲和性的差异,使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用,从而使各组分分离。三、应用1、分离、提纯化合物一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物,一般应用化学方法分离很困难,但应用色谱法分离,有时可得
2、到满意的结果。有机化合物中含有少量结构类似的杂质,不易除去,可利用色谱法分离以除去杂质,得到纯品。2、鉴定化合物在条件完全一致的情况,纯碎的化合物在薄层色谱中都呈现一定的移动距离,称比移值(Rf值)即原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值。 是色谱法中表示组分移动位置的一种方法的参数。在一定的色谱条件下,特定化合物的Rf值是一个常数,因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。3、观察一些化学反应是否完成,可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失,以证明反应完成与否。四实验步骤1点样先用铅
3、笔在距薄层板上下两端1cm处轻轻划一横线,然后用毛细管吸取样品,在一端样点间距离应为1cm处点样。点样要轻,不可刺破薄层。2、展开薄层色谱的展开,需要在密闭容器中进行。为使溶剂蒸气迅速达到平衡,可在展开槽内衬一滤纸。在层析缸中加入配好的展开溶剂,使其高度不超过1cm。将点好的薄层板小心放入层析缸中,点样一端朝下,浸入展开剂中。盖好瓶盖,观察展开剂前沿上升到距上端1cm时取出3、显色晾干或者吹干溶剂,紫外灯下观察斑点位置,计算Rf值。
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