2017版高考生物大一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用讲义.doc

《2017版高考生物大一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第43讲 微生物的培养与应用讲义.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第43讲　微生物的培养与应用　1.微生物的分离和培养　2.培养基对微生物的选择作用　3.利用微生物进行发酵来生产特定的产物　　　　　　[学生用书P295])一、微生物的实验室培养1．培养基(1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。(2)营养构成：一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。(3)种类：按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。2．无菌技术(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。(2)关键：防止外来杂菌的入侵。(3)方法3．大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛

2、肉膏蛋白胨固体培养基计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)纯化大肠杆菌①关键的步骤是接种。②纯化培养方法：平板划线法和稀释涂布平板法。③纯化培养原理：在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落，即可获得较纯的菌种。二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数1．分离原理：土壤中细菌之所以能分解尿素，是由于它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起催化作用。以尿素为唯一氮源的培养基能促进分解尿素的细菌的生长和繁殖，并抑制或阻止其他微生物的生长，从而将目的菌分离。2．统计菌落数目：统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。3．实验流程：土壤取样→制备培养基→微生物的培养与观察→细菌

3、的计数。三、分解纤维素的微生物的分离1．纤维素酶(1)组成：纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。(2)作用2．菌种筛选(1)方法：刚果红染色法。(2)原理　　　　　　　　　纤维素分解菌　　　　　　　　　↓→红色复合物红色消失、出现透明圈。即：使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。3．筛选流程土壤取样：富含纤维素的环境↓选择培养：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的数量↓梯度稀释↓涂布平板：将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈1．(2016·北京海淀区期末)培养基

4、中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。(√)2．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌，是否无菌操作影响较小。(√)3．培养基分装到培养皿后进行灭菌。(×)4．从有机废水中分离微生物用于废水处理时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。(×)5．外植体消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。(√)6．(2015·高考四川卷T3D)用稀释涂布平板法培养计数，应选择有30～300菌落数的平板。(√)7．(2016·山东青岛市期末)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。(√)8．分解尿素的细菌在分解尿素时，可以将尿素转化为氨，使

5、得培养基的酸碱度降低。(×)9．土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是必不可少的。(×)10．在富含纤维素的培养基中加入刚果红染色剂，若出现周围存在透明圈的菌落，则说明筛选到了分解纤维素的微生物。(√)考点一　培养基及微生物的纯化培养技术[学生用书P296]1．培养基的种类(1)按物理状态分类培养基种类特点用途液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基加凝固剂(如琼脂)微生物分离、鉴定，活菌计数，菌种保藏半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定(2)按功能分类种类制备方法原理用途举例选择培养基培养基中加入某些化学物质依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计从众多微生物中分离

6、所需的微生物加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基培养基中加入某种指示剂或化学药品产生特定的颜色或其他变化鉴别不同种类的微生物用伊红—美蓝培养基鉴别大肠杆菌2.培养基的配制原则(1)目的要明确：配制时应根据微生物的种类、培养目的等确定配制的培养基种类。(2)营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜：细菌为6.5～7.5，放线菌为7.5～8.5，真菌为5.0～6.0，培养不同微生物所需pH不同。3．消毒与灭菌条件结果常用方法应用范围消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物煮沸消毒法日常用品巴氏消毒法不耐高温的液体化学药剂消毒法用酒精擦

7、拭双手，用氯气消毒水源灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌法接种工具干热灭菌法玻璃器皿、金属工具高压蒸汽灭菌法培养基及容器4.大肠杆菌的纯化(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是纯化的细菌菌落。(2)纯化微生物的接种方法比较项目平板划线法稀释涂布平板法关键操作接种环在固体平板培养基表面连续划线①一系列的梯度稀释；　②涂布平板法操作注意事项每次划线前后均需灼烧接种环稀释度要足够高，为确