TCTE3mRNA在人肝癌细胞株中的表达特征-论文.pdf

《TCTE3mRNA在人肝癌细胞株中的表达特征-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、总第15卷171期大众科技VOl_15No．112013年11月PopularScience&TechnologyNovember2013TCTE3mRNA在人肝癌细胞株中的表达特征卓少元张保静(1．广西中医药大学基础医学院，广西南宁530001；2．广西中医药大学附属瑞康医院，广西南宁530011)【摘要】探讨TCTE3mRNA在人肝癌细胞株中的表达水平及意义。采用实时荧光定量PCR技术分别检测TCTE3基因在常规培养或缺氧诱导(COC12为诱导剂)的人肝癌细胞株中的表达情况。TCTE3mRNA在常规培养的人正常肝细胞株L02，肝癌细胞株Be1．7402、SM

2、MC．7721、HepG2和QGY．7701中不表达或极低表达；但经缺氧诱导后，SMMC．7721细胞中的TCTE3mRNA表达量逐渐升高，4h达到最大，随后逐渐降低，与HIFlamRNA表达的曲线变化有一定相似之处，只是这种变化的时间要早于HIFla基因。在缺氧状态下肝癌细胞TCTE3mRNA表达增加，且这种上调表达可能对HIFlamRNA的表达有一定的促进作用。【关键词】TCTE3；肝癌细胞；缺氧【中图分类号】R36【文献标识码】A【文章编号】1008．1151(2013)11-0105．03ExpressionandsignificanceOfTCTE3m

3、RNAinlivercancercellsculturedAbstract：ToinvestigategenesexpressionandsignificanceofTCTE3mRNAinhvercancercenscultured．TCTE3mRNAwereexaminedinfivercancerceUsunderconventionalcultureorhypoxia——inducedculturebyCOC12byreal——timequantitativePolymerasechainreaction(PeR)．Noexpressionorlowexp

4、ressionofTCTE3mRNAlevelsinnormalhumanfiverL02ceUs，andlivercancerBel-7402，SMMC一7721，HepG2orQGY一7701cells．However，AfterSMMC一7721ceHswereincubatedwithhypoxia—inducibleCOC12，theexpressionofTCTE3mRNAbegantOincreasegradually，peakedat4h，andthendecreased，whichhassomesimilaritieswichHIFlamRNA

5、expressioncurve，butsuchchangesearlierthanHIFlamR．NA．TheexpressionofTCTE3rnRNAlevelsincreased，whichcouldpromoteHIFlamRNAexpression．Keywords：TCTE3；livercancercells；hypoxia原发性肝癌是我国常见的难治恶性肿瘤，也是广西地区I材料与方法高发的恶性疾病之一，防治十分困难。肝癌早期诊断和预后指标的筛选，及肿瘤的免疫治疗一直是研究人员关注的焦点。1．1主要材料及试剂前期研究发现Tcre3基因在Hzz肝癌细胞株

6、接种早期的邪毒壅盛证荷瘤小鼠肿瘤组织中高度表达，而在同期虚证荷瘤小鼠，人正常肝细胞株L02，及人肝癌细胞株Bei-7402、以及接种中期和接种晚期的荷瘤小鼠肿瘤组织中表达水平均SMMC一7721、HepG2和QGY一7701(广西医科大学组织胚胎教研非常低。Tcre3基因编码产物是一种外动力蛋白臂的轻链，室馈赠，购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心)，DMEM高糖培养基、胎牛血清(加拿大WISENT生物技术特异的存在于小鼠睾丸组织中，在雄性生殖细胞分化和精子活力产生中发挥重要作用’；人TCTE3基因和小鼠Fcte3基有限公司)，氯化钴CoCl(美国Sig

7、ma公司)，组织／细胞总因具有高度的同源性，主要表达于睾丸中，在男性生殖细胞RNA提取试剂盒(离心柱型)(天根生化科技有限公司)，逆转发育过程中起重要作用。目前，尚未见TCTE3基因在人类肿录试剂盒(加拿大MBIFermentas公司)，FastStartUniversal瘤组织和肿瘤细胞株表达情况的报道。为此，本研究重点观SYBRGreenMasterMIX(Rox)(RocheAppliedScience)。察了TCTE3基因在常规培养或缺氧诱导的人肝癌细胞株中的1．2主要设备表达情况。荧光定量PCR仪(ABI7500)、紫外分光光度计(UV2000I【收稿

8、日期】2013—10—1