BmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响.pdf

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1、第42卷第2期西北农林科技大学学报(自然科学版)Vo1．42No．22014年2月JournalofNorthwestA&FUniversity(Nat．Sci．Ed．)Feb．2014网络出版时间：2014一Ol一02i6：06DOI：10．13207／j．cnki．jnwa{u．2014．02．066网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13207／j．cnki．jnwafu．2014．02．066．htmlBmNPV对家蚕BmN细胞周期及周期蛋白基因表达水平的影响刘丽华，沈卫德。，李兵，王文兵(1通化师范学院生物系，

2、吉林通化134000；2苏卅I大学基础医学与生物科学学院，江苏苏州2151233现代丝绸国家工程实验室，江苏苏州215123；4江苏大学生命科学研究院，江苏镇江212001)[摘要]【目的】研究家蚕核型多角体病毒(BombyzmoriNuc1e叩olyhedroviruses，BmNPV)对家蚕卵巢细胞系(BraN)细胞周期及细胞周期蛋白基因转录水平的影响。【方法】用BmNPV感染家蚕BmN细胞，分别在病毒感染后的不同时间(12，24，36，48h)，应用实时荧光定量PCR方法检测细胞周期蛋白基因CyclinA、CyclinB、CyclinE的表达情况，用流式细

3、胞仪检测细胞周期的变化。【结果1BmNPV感染24h后，BmN细胞出现明显感染症状，变为圆形；48h后细胞核内出现多角体。随着感染时间的延长，CyclinA、CyclinB、CyclinE基因表达量均下降，分别在感染l2，24，36h后，表达量降低为0。流式细胞仪检测结果显示，在BmNPV感染后24h左右，抑制于G2／M期的BraN细胞达到68。【结论1BmNPV感染家蚕BmN细胞后，导致CyclinB、CyclinE基因表达量降低，对CyclinA基因表达量的影响较小；同时BmNPV感染可以将BmN细胞发育抑制于G2／M期。[关键词]BmNPV；Cyclin基

4、因；细胞周期[中图分类号]$884．51[文献标志码]A[文章编号]1671-9387(2014)02—0041一O5EffectofBmNPVonBmNcelIcycleandexpressionlevelofCyclininsilkwormLIULi—hua，SHENWei—de。，LIBing，WANGWen—bing(1DepartmentofBiology，TonghuaNormalUniversity，Tonghua，Jilin134000，China；2SchoolofBasicMedicineandBiologicalSciences，Sooch

5、owUniversity，Suzhou，Jiangsu215123，China3NationalEngineeringLaboratoryforModernSilk，Suzhou，Jiangsu215123，China；4InstituteofLifeSciences，JiangsuUniversity，Zhenjiang，Jiangsu212001，China)Abstract：[Objective]ThisstudyaimedtostudytheeffectofBmNPV(BombyxmoriNucleopolyhe—droviruses)onthecell

6、cycleandexpression1evelofCyclininsilkwormBmNcell1ine．[Method]BmNcellwasinfectedwithBmNPV，andthetranscriptionlevelsofCyclinA，CyclinBandCyclinEgenesweredetec—tedbyQRT—PCRatdifferenttimes(12，24，36，and48h)．Flowcytometerwasusedtodetectthechangeofcellcycle．[Result]BmNcellsshowedobviousinfe

7、ctionsymptoms24hafterinfectionandtheshapeofcellschangedtocircle．Polyhedrosisappearedinthenucleus48hafterinfection．AStheincreaseoftimeaf—terviralinfection，theexpressionlevelsofCyclinA，CyclinBandCyclinEdecreased．TheexpressionlevelsofCyclinA，CyclinB，CyclinEreducedtozeroat12，24and36h，res

8、pectively．Fl