巴西橡胶树胶乳dna的提取及特性分析

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1、热带作物学报2013，34(12)：2368—2373ChineseJournalofTropicalCrops巴西橡胶树胶乳DNA的提取及特性分析吴坤鑫·，王震，唐文·一，王颖，陈雄庭，陈守才s，张秀春-料·裹农昱业蕃部冀热寨带嚣作翥物羞生物蓥技莱术妻重点葬开轰放篓实蠢验墨室海佴南l芊J海，耳口5711012海南大学农学院．海南海口5702283中国热带农业科学院橡胶研究所．海南儋州571737摘要利用改良的SDS一醋酸钾沉淀法可以有效分离纯化胶乳DNA胶乳经过高速离心后分为3层．上层主要是橡胶粒子，中间层是胶乳的可溶性胞质成分

2、即C一乳清，下层主要是黄色体。分别对这3层组份进行DNA提取分析．结果显示胶乳DNA主要存在于黄色体层限制性内切酶分析表明所得胶乳DNA是序列不均一的DNA分子胶乳DNA主要由线粒体DNA和少量细胞核DNA组成健康树中胶乳DNA含量要大于死皮树胶乳DNA含量。关键词橡胶树；胶乳；脱氧核糖核酸：特性分析中图分类号$794．1文献标识码AExtractionandCharacteristicsAnalysisofLatexDNAin丑veabrasiliensisWUKunxin，WANGZhen，TANGWen，WANGYing，C

3、HENXiongtin．CHENShoucai．ZHANGXiuchun1KeyLaboratoryofTropicalCropBiotechnology,MinistryofAgriculture／InstituteofTropicalBioscieneeandBiotechnology,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，Haikou，Hainan571101，China2CollegeofAgronomy，HainanUniversity，Halkou，Hainan570

4、228,China3InstituteofRubber,ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences．Danzhou,Hainan57l737．ChinaAbstractThetotallatexDNAinHeveabrasiliensiscouldbeobtainedbytheimprovedSDS-KAcprecipitatingmethod．AfterhighcentrifugationtheHevealatexwasseparatedintothreemainfractions：

5、therubbercreamatthetop．theaqueousC—serumandthebottomfraction—lutoids．WeextractedandanalyzedtheDNAconcentoftherubbercream，theaqueousC—serumandthelutoidsfraction．ResuhsshowedthatthelatexDNAmainlyexistedinthelutoidsfraction．RestrictendonucleasesanalysisoflatexDNAdemonstr

6、atedthatlatexDNAwereheterogeneousDNASequences．TheanalysisofPCRresultsindicatedthatthelatexDNAprobablycontainedmainlymitochondrialDNAandsomenucleusDNA．Inaddition，thelatexDNAcontentfromthehealthyrubbertreeswashigherthanthatfromtheTPDtrees．KeywordsHeveabrasiliensis；Latex

7、；DNA；Characteristicsanalysisdoi10．3969／j．issn．1000—2561．2013．12．012橡胶树的树皮被割开后流出的胶乳是乳管细这种合成能力的大小和胶乳核酸含量的多少与胶乳胞中特殊的原生质成分对胶乳成分中与胶乳再的产量呈正相关[4-5一生密切相关的核糖核酸fRNA)的研究前人已经有曾日中等[91研究发现跟健康树相比较．死皮树较多报道⋯McMullen[2-3]最先证实离体胶乳中存胶乳中核糖核酸酶活性增强而RNA含量下降迄在核蛋白体随后的研究进一步证明在离体胶乳今有关胶乳DNA的研究报道还

8、很少Dickenson[0t中含有rRNA、tRNA和mRNA等成分I4]胶乳的用电镜观察5年生橡胶树树皮的乳管细胞时发现有RNA主要分布于C一乳清内．少量存在于黄色体乳一些线粒体位于细胞中央．推测这部分线粒体会随清中离体胶乳具有合成RNA和蛋白质