SN 0332-1994 出口食品中沙门氏菌(辛酯酶荧光)检验方法.pdf

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1、SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN0332一94出口食品中沙门氏菌(辛醋酶荧光)检验方法MethodforinspectionofSalmonellainfoodsforexport-Fluorescencemeasurementofcaprylate1994一12一26发布1995一05一01实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发布中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中沙门氏菌(辛醋酶荧光)SN0332一94检验方法MethodforInspectionofSalmonellainfoodsforexport-Fluorescencemeasurementofcapr

2、ylate主题内容与适用范围本标准规定了用4一甲基伞形酮辛酷试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验,其他食品可参照使用。弓1用标准SN0170出口食品中沙门氏菌(包括亚利桑那菌)检验方法符号MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4一甲基伞形酮辛醋)的缩写。MUCAP试剂:用4一甲基伞形酮辛酷配成的试剂的缩写。SS琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。HE琼脂:HektoenEnteric琼脂培养基。设备与材料4.1紫外光灯:波长366nm,功率36w,4.2放大镜:3^-4Xo4.3毛细滴管。培养基与试荆51培养基与

3、试剂按SN017。第5章,另补充以下部分:SS琼脂培养基(含100蔗糖):见附录Al.525.3HE琼脂培养基:见附录A2,MUCAP试剂:见附录A3,5.4氧化酶试纸:见附录A4,6样品制备及增菌培养参照SN0170进行。分离培养7.1将增菌培养液摇匀,挑取一接种环,划线接种于SS和HE琼脂培养基各一个,于36士1℃培养中华人民共和国国家进出口商品检验局1994门2-26批准1995-05-01实施SN0332一9424士2h,7.2观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落,应再继续培养24士2h。沙门氏菌的菌落特征见表1,表1沙门氏菌属菌落特征菌落特征SS平板HE平板圆形,边

4、缘整齐,淡黄色,半透明,有或无黑色中圆形,边缘整齐;蓝绿色至蓝色,有或无黑色中心,周心;周围培养基透明淡黄色围培养基透明墨绿色8测定a.,从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落),用玻璃笔做好标记并编号。8.2用毛细滴管吸取MUCAP试剂,加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部滴加试剂后,将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为MUCAP试验阳性,将阳性菌落号记录下来。8.3用接种环挑取荧光反应阳性菌落,涂于氧化酶试纸上,观察涂菌点是否变蓝色。于10min内变蓝色为氧化酶试验阳性;不变色为阴性。结果的报告9.1MUCAP试验阴性的样品,报告

5、为“未检出沙门氏菌”。9.2MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品,按SN0170第四章继续进行生化和血清学试验,并根据试验结果报告。SN0332一94附录A培养墓和试荆(补充件)A1SS琼脂培养墓(含100蔗箱)牛肉浸膏5.0g蛋白陈5.0g乳糖10.0g蔗糖10.0g胆盐No.38.5g柠檬酸钠&59硫代硫酸钠1.09柠檬酸铁1.0g煌绿1.0g中性红0.025g琼脂13.5g蒸馏水1000mL将各成分溶于水,煮沸4-5min。最终pH7.010.2。冷至55一66℃.倾注平板。A2HE琼脂培养荃肪蛋白膝12.0g酵母浸出物3.0g乳糖12.0g蔗糖12.0g水杨素2.0g混合胆盐9.

6、0g氯化钠5.0g硫代硫酸钠5.0g柠檬酸铁按1.5g澳赓香草酚蓝0.065g酸性复红0.1g琼脂14.0gSN0332一94蒸馏水1000mL将各成分溶于水,煮沸4-5min。最终pH7.5士。.2。冷至55-60℃,倾注平板。A3MUCAP试荆按生产者提供的使用说明制备工作稀释液,贮于4℃冰箱备用。A4级化酶试纸氧化酶试液:甲液:1y}a-蔡酚乙醇液;乙液:1%二甲基对苯二胺草酸盐水溶液。氧化酶试纸:将甲液与乙液等量混合。取定性滤纸,浸透混合液后,于70-a00C烘箱烘干。剪成适当大小的纸条,密封于塑料袋或瓶中,贮于4℃冰箱备用。附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出

7、。本标准由中华人民共和国内蒙古进出口商品检验局起草。本标准主要起草人甄宏太、杨素贤、刘中学、苏庆、周云霞。

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