生物化学复习重点.doc

《生物化学复习重点.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第二章蛋白质1、凯氏定氮法：蛋白质含量＝总含氮量－无机含氮量）×6.25例如：100%的蛋白质中含N量为16%，则含N量8%的蛋白质含量为50%100%/xg=16%/1gx=6.25g2、根据R基的化学结构，可将氨基酸分为脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸和杂环亚氨基酸。按照R基的极性，可分为非极性R基氨基酸、不带电荷的极性R基氨基酸、极性带负电荷的R基氨基酸、极性带正电荷的氨基酸。类别氨基酸名称缩写符号简写符号非极性丙氨酸AlaA缬氨酸ValV亮氨酸LeuL异亮氨酸IleI苯丙氨酸PheF甲硫氨酸（蛋氨酸）MetM脯氨酸ProP色氨酸TrpW极性不带电

2、荷甘氨酸GlyG丝氨酸SerS苏氨酸ThrT天冬酰胺AsnN谷氨酰胺GlnQ酪氨酸TyrY半胱氨酸CysC极性带负电荷（酸性氨基酸）天冬氨酸AspD谷氨酸GluE极性带正电荷（碱性氨基酸）组氨酸HisH赖氨酸LysK精氨酸ArgR3、氨基酸的重要理化性质（1）一般物理性质无色晶体，熔点极高（200℃以上），不同味道；水中溶解度差别较大（极性和非极性），不溶于有机溶剂。氨基酸是两性电解质。氨基酸等电点的确定：酸碱确定，根据pK值（该基团在此pH一半解离）计算：等电点等于两性离子两侧pK值的算术平均数。（2）化学性质①与水合茚三酮的反应：Pro产生黄色物质，其它为

3、蓝紫色。在570nm（蓝紫色）或440nm（黄色）定量测定（几μg）。②与甲醛的反应：氨基酸的甲醛滴定法③与2,4-二硝基氟苯(DNFB)的反应：形成黄色的DNP-氨基酸，用来鉴定多肽或蛋白质的N端氨基酸，又称Sanger法。或使用5-二甲氨基萘磺酰氯（DNS-Cl，又称丹磺酰氯）也可测定蛋白质N端氨基酸。④与异硫氰酸苯酯（PITC）的反应：多肽链N端氨基酸的α-氨基也可与PITC反应，生成PTC-蛋白质，用来测定N端的氨基酸。4、肽的结构线性肽链，书写时规定N端放在左边，C端放在右边，用连字符将氨基酸的三字符号从N端到C端连接起来，如Ser-Gly-Tyr-

4、Ala-Leu。命名时从N端开始，连续读出氨基酸残基的名称，除C端氨基酸外，其他氨基酸残基的名称均将“酸”改为“酰”，如丝氨酰甘氨酰酪氨酰丙氨酰亮氨酸。若只知道氨基酸的组成而不清楚氨基酸序列时，可将氨基酸组成写在括号中，并以逗号隔开，如（Ala，Cys2，Gly），表明此肽有一个Ala、两个Cys和一个Gly组成，但氨基酸序列不清楚。由于C-N键有部分双键的性质，不能旋转，使相关的6个原子处于同一个平面，称作肽平面或酰胺平面。5、、蛋白质的结构（一）蛋白质的一级结构（化学结构）一级结构中包含的共价键主要指肽键和二硫键。（二）蛋白质的二级结构（1）α-螺旋（如毛

5、发）结构要点：螺旋的每圈有3.6个氨基酸，螺旋间距离为0.54nm，每个残基沿轴旋转100°。（2）β-折叠结构（如蚕丝）（3）β-转角（4）β-凸起（5）无规卷曲（三）蛋白质的三级结构（如肌红蛋白）（四）蛋白质的四级结构（如血红蛋白）6、蛋白质分子中氨基酸序列的测定氨基酸组成的分析：•酸水解：破坏Trp,使Gln变成Glu,Asn变成Asp•碱水解：Trp保持完整，其余氨基酸均受到破坏。N-末端残基的鉴定：鉴定N-末端的氨基酸残基常用2,4-二硝基氟苯（DNFB）的反应或丹磺酰氯反应。异硫氰酸苯酯（PITC）反应也可用于鉴定N-末端的氨基酸残基，但主要是用于

6、测定肽段的氨基酸序列。C-末端残基的鉴定：•肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中只有C端氨基酸以游离形式存在。•还原法：肽链C端氨基酸可用硼化锂还原成相应的α-氨基醇，可用层析法加以鉴别。•羧肽酶法：羧肽酶从羧基端（C端）一个一个切。多肽链的裂解：酶切位点或作用特点：•胰蛋白酶：Lys,Arg的C侧•糜蛋白酶（胰凝乳蛋白酶）：Phe,Tyr,Trp的C侧•梭菌蛋白酶：Arg的C侧•葡萄球菌蛋白酶：Asp或Glu的C侧•嗜热菌蛋白酶：Leu,Ile,Val的N侧•氨肽酶：从氨基端（N端）一个一个切•溴化氰（CNBr）:Met的C端•羟胺：Asp的C侧

7、，Gly的N侧7、蛋白质的沉淀反应：加高浓度盐类；加有机溶剂；加重金属盐类；加某些酸类；加热。8、氨基酸的颜色反应第三章核酸1、核苷酸由含氮碱基（嘌呤或嘧啶），戊糖（核糖或脱氧核糖）和磷酸组成。核酸是核苷酸的多聚物，其连接键是3’，5’-磷酸二酯键。2、生物体内的AMP（腺苷酸）可与一分子磷酸结合，生成ADP（腺苷二磷酸），ADP再与一分子磷酸结合，生成腺苷三磷酸（ATP），各种核苷三磷酸（ATP、GTP、CTP和UTP）是体内RNA合成的直接原料，各种脱氧核苷三磷酸（dATP、dGTP、dCTP、dTTP）是DNA合成的直接原料。在体内能量代谢中的作用：AT

8、P—能量“货币”UTP—参加糖的互相转