胃癌患者外周血Survivin基因mRNA表达及其临床意义.doc

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1、胃癌患者外周血Survivin基因mRNA表达及其临床意义【摘要】目的检测胃癌患者外周血中肿瘤细胞Survivin基因mRNA表达，探讨其在胃癌微转移检测中的意义。方法采用逆转录分子信标实时荧光定量PCR(RT-QPCR)方法，以Survivin基因cDNA克隆重组质粒为标准品，检测胃癌患者外周血肿瘤细胞屮Survivin基因mRNA模板拷贝数，分析拷贝数与临床资料之间的关系。结果Survivin基因mRNA分子信标实吋定量方法的线性检测范围为104-109个拷贝,外周血肿瘤细胞Survivin基因模板拷贝数与患者的性别、年龄、TNM分期及病理类型差异无显著性(P>0・05),

2、而与患者淋巴结转移及生存状况差异有显著性(P<0.05)o结论外周血肿瘤细胞Survivin基因mRNA表达可用于检测胃癌的血性转移，为早期诊断微转移的存在、评价患者预后、指导临床治疗提供依据。【关键词】定量PCR；survivin；微转移；外周血；胃癌ExpressionofsurvivinmRNAinperipheralbloodofpatientswithgastriccanceranditsclinicalimplication[Abstract]ObjectiveTostudythemRNAexpressionofsurvivingeneinperipheral

3、bloodofpatientswithgastriccanceranditsclinicalsignificance・MethodsTheexpress!onofsurvivingenewasdetectedbyreversetranscription—quantitativepolymerasechainreaction(RT-Q卩CR)usingamolecularbeaconprobe,whilerecombinationplasmidcontainingthesequenceofsurvivinwasstandard.Itwasanalyzedthattherelati

4、onshipbetweencopiesofsurvivinexpressioninperipheralbloodwithgastriccancerandclinicaldata.ResultsAlinearstandardcurvewasobtainedbetween104and109copies・ThecopiesofsurvivinmRNAdidnotcorrelatewithgender,age,TNMstageandhistologicaltypes(P>0.05).Thereweretherelationshipsbetweencopiesofsurvivingene

5、withlymphnodemetastasisandpoorsurvival(P&It;0.05)・ConclusionTheexpressionofsurvivinmRNAcanbeusedtodetectemicro-metastasisinperipheralbloodcirculationofgastriccancer.Itisausefulmarkertopredictprognosisanddecideonclicinaltherapy.【Keywords】quantitativePCR；survivin；micrometastasis；peripheralbloo

6、d；gastriccarcinoma胃癌是人类常见的恶性肿瘤之一，在临床治疗中，复发和转移是常见的问题，直接影响到患者的预后。早期发现肿瘤患者外周血中是否有肿瘤细胞存在，不仅对判断肿瘤转移和复发有着重耍的价值，而且对指导临床治疗，改善患者预后有重要的意义。随着逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术的广泛应用，可以检测到肿瘤患者外周血中常规方法(如CT、MRI.普通形态学及免疫组织化学等)无法检测到的极少数肿瘤细胞屮特异基因mRNA的表达，预示肿瘤的微小转移存在。近来，特别是荧光实时定量PCR技术的发展，不仅可以定量检测mRNA的原始模板拷贝数，而且由于特异性探针的引入，使其灵敏

7、度也高于常规PCR的定性检测。Survivin是1997年［1］发现的凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosis,TAP)家族成员之一，它在终末分化的成人正常细胞中很少表达，而在绝大多数肿瘤细胞中高表达［2,3］o文献报道［4-6］,胃癌患者中Survivin基因mRNA表达阳性率高达60%以上，使其很有可能成为一个潜在的胃癌肿瘤标志物。本文釆用逆转录分子信标实时荧光定量PCR(RT-QPCR)技术，选择Survivin基因作为胃癌微转移的研究靶点，定量检测胃癌患者外周血中Sur