《种子扩大培养》PPT课件.ppt

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1、种子扩大培养1、在空气过滤除菌的过程中空气储罐的作用是，丝网除沫器的作用是。空气加热设备的作用是。2、空气过滤器按过滤介质空隙大小分为和。3、介质孔隙大于被拦截的微生物大小，但介质层有一定的厚度，机理是静电、扩散、惯性及拦截作用。4、在实验室或中试规模，空气过滤器只设级，而大型发酵工厂大多采用级过滤。5、工厂发酵生产中棉花活性炭过滤器一般用作，金属烧结管和微孔膜过滤器一般用作。缓冲空气脉冲除去较小液滴降低空气的湿度绝对过滤深层过滤一二总过滤器分过滤器1、连续提供一定流量的压缩空气。VVM一般为0.1～2.0m3。2、空气的

2、压强(表压)为0.2～0.4MPa。3、进入过滤器之前，空气的相对湿度￠≤70％。4、进入发酵罐的空气温度可比培养温度高10—30℃。5、压缩空气的洁净度，在设计空气过滤器时，一般取失败概率为10-3为指标。发酵用无菌空气的基本要求1、湿热灭菌的条件是。2、发酵培养基灭菌中，方法对灭菌的蒸汽压力要求高。在分批灭菌过程中要先通过进行预热，在通入蒸汽升温到121℃。3、连消的特点是和，适合发酵罐。夹套或蛇管121℃30min连续灭菌快速高温大型对数穿透定律：对数残留定律对数生长定律比热死速率过滤常数比生长速率发酵工程的流程空气

3、空气净化处理保藏菌种斜面活化扩大培养种子罐发酵罐培养基制备灭菌灭菌产物分离纯化成品原料预处理种子扩大培养现代的发酵工业生产规模越来越大，每只发酵罐的容积有几十立方米甚至几百立方米，要使小小的微生物在几十小时的较短时间内，完成如此巨大的发酵转化任务，那就必须具备数量巨大的微生物细胞才行。一、概述1、定义：菌种的扩大培养就是把保藏在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化，再经过扁瓶或摇瓶和种子罐，逐级扩大培养后达到一定的数量和质量的纯种培养过程。这些纯种的培养物称为种子。2、作为生产用种子的准则1）菌种细胞

4、的生长活力强，移种至发酵罐后能迅速生长，延滞期短。2）生理性状稳定3）菌体总量及浓度能满足大容量发酵罐的要求4）无杂菌污染5）保持稳定的生产能力实验室种子制备阶段（一级种子培养）生产车间种子制备阶段（二级种子培养、三级种子培养）二级发酵三级发酵砂土孢子冷冻干燥孢子斜面孢子摇瓶液体培养茄子瓶斜面培养固体培养基培养一级种子罐二级种子罐发酵罐二、种子制备工艺生产菌种的制备两个过程：在固体培养基上生产大量孢子的孢子制备过程和在液体培养基上生产大量菌丝的种子制备过程孢子的产生条件？孢子制备放线菌孢子的制备工艺过程菌种母斜面摇瓶种子种

5、子罐发酵罐子斜面注意事项限制碳源(约1%)和氮源(不超过0.5%)；培养温度多为28℃，少数为37℃，培养时间为5~14天；采用孢子进罐：工艺简单，批间差异小，便于控制孢子质量；采用菌丝进罐：可缩短种子罐内的培养时间(尤适生长缓慢的菌种)。霉菌孢子的制备注意事项天然农产品因具有独特的营养成分　　　和较大表面积而适合作霉菌的培养基培养温度多为25~28℃，培养时间为4~14天细菌孢子的制备注意事项1.适合采用碳源限量而氮源丰富的培养基2.培养温度多为37℃，少数为28℃，培养时间细菌菌体为1~2天，产芽孢的细菌为5~10天种

6、子制备概念：指将固体培养基上培养出的孢子或菌体转入到液体培养基种培养，使其繁殖成大量菌丝或菌体的过程。摇瓶种子＋种子罐种子摇瓶种子制备孢子发芽或菌丝繁殖缓慢的菌种需将孢子经摇瓶培养成菌丝后再进入种子罐，摇瓶具有浓缩种子罐的作用，其培养基配方和培养条件与种子罐相似。种子培养基营养应丰富完全，易被菌体利用，浓度不宜过高。种子罐种子制备A.孢子或摇瓶菌丝被接入体积较小的种子罐中，培养后形成的大量菌丝，这种种子称为一级种子把一级种子转入发酵罐中发酵，称为二极发酵种子罐的级数主要决定于菌种的性质、菌体的生长速度和发酵设备的合理应用种

7、子罐级数减少，有利于生产过程的简化和发酵过程的控制，减少因种子生长异常而造成的发酵波动实验室种子制备阶段：琼脂斜面固体培养基扩大培养摇瓶液体培养生产车间种子制备阶段：种子罐扩大培养对接种物的一般要求：1）应以高产菌株中分离获得的纯系作为出发菌株。菌株纯度高，性状稳定，不易发生变异。2）生理活性强。若以菌体细胞为接种物，应采取正在旺盛生长的繁殖期细胞，菌体细胞应均匀，同步率高。以孢子为接种物，应采用易于萌发的孢子。为了提高孢子的萌发率，有时需采取一些特殊措施如：丙酮丁醇梭菌的孢子在沸水中处理90秒后在放入液体培养基底部，可获

8、得较高的发芽率。有的孢子不被水浸润，浮在液体培养基表面或贴在培养容器内壁，不形成悬液。可在培养基中加入少量无毒的表面活性剂，帮助形成悬液。1、实验室种子制备对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子，孢子可直接作为种子罐的种子；这样操作简便，不易污染杂菌。如：柠檬酸生产的制