基于溶酶体、核苷酸检测的荧光探针的设计、合成及生物活体成像研究.pdf

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1、分类号密级公幵编号碛士研究《位讼夂题目基于溶酶体、核苷酸检测的荥光探■謹十、像赚学院（所、中心）化学科学与工程学院专业名称分析化学研究生姓名邹晓菊学号导师姓名周莹职称教授年月论文独创性声明及使用授权本论文是作者在导师指导下取得的研宄成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，不存在剽窃或抄袭行为。与作者一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。现就论文的使用对云南大学授权如下：学校有权保留本论文（含电子版），也可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文；学校有权公布论文的全部或部分内容，可以

2、将论文用于查阅或借阅服务；学校有权向有关机构送交学位论文用于学术规范审查、社会监督或评奖；学校有权将学位论文的全部或部分内容录入有关数据库用于检索服务。内部或保密的论文在解密后应遵循此规定）研究生签名：件导师签名：日期：云南大学硕士学位论文摘要细胞组成了生命，在细胞的分化、代谢和衰老过程中，核苷酸无处不在。它可以改善机体功能、增强器官的自身调节能力。探针可以用来定位细胞中的小分子，研究细胞内的氧化还原反应，细胞的分裂和凋亡，还可以检测病毒细胞融合的过程，分析细胞膜表面的分子结构性质等等。因此，用来定位细胞内小分的探针对于人们理解和分析细胞器内的生物进程是很有必要的。

3、为了专一高效地识别生物分子和细胞器，我们开展了以下工作：设计合成了一个基于香豆素衍生物的化合物，通过活体成像研究说明探针可以检测外源性和内生性的。通过对细胞和线虫检测的共定位分析实验发现探计和商业化的溶酶体染料具有较高的系数和重叠系数。探针是第一个含有二硫键香豆素衍生物的追踪黑腹果蝇体内富集情况的探计，也是第一个追踪基因突变的线虫（体内溶酶体破裂的探针。设计合成了一个基于，萘酰亚胺衍生物的化合物，将其用于识别核苷酸。与核苷酸的尿苷通过氢键作用结合，具有响应速度快、灵敏度高的特点。实验证明在体系下加入，溶液荧光增强了倍，探针溶液本身荧光由无色到加入后变成明亮的蓝色荧光

4、。并且将成功应用到生物体成像之中。实现了对细胞和线虫内的检测。关键词：香豆素；萘酰亚胺；荧光探针；溶酶体；核苷酸AbstractAbstractLifeismadeofcells,duringtheprocessofcelldiferentiation，，，，，云南大学硕士学位论文目录摘要录第一章前言棘荧光探针旳定义和作用焚光探针的发展焚光探针的设计溶酶体探针的意义和研究进展溶酶体探针的意义溶酶体探针的研宄进展核苷酸探针的意义和研宄进展核苷酸探针的意义核苷酸探针的研宄进展第二章以溶酶体为目标的检测的焚光探针及其在活体成像中的应用舰探针分子的设计合成路线实验部分药品和

5、仪器化合物的合成光谱测试方法细胞的培养和共聚焦成像线虫的培养和共聚焦成像果蝇的饲养及活体实验目录草履虫的养殖及活体实验结果与讨论对化合物的荧光光谱的变化对化合物的紫外光谱的测定化合物的离子选择性测试探针的检测机理验证实验化合物的其他常数分析活体成像实验及应用活细胞焚光成像线虫的荧光成像果蝇体内外源性的荧光成像探针追踪线虫溶酶体的破裂草履虫的荧光成像本章小结第三章基于萘二甲酰亚胺的检测的荧光探针及其在活体成像中観探针分子的设计探针的合成路线实验部分药品和仪器化合物的合成光谱测试方法细胞的荧光成像线虫荧光成像结果与讨论对化合物的荧光光谱的变化对化合物的紫外光谱的影响云南

6、大学硕士学位论文化合物的离子选择性测试探针的检测机理验证实验探针的毒性测试探针的其他常数分析活体成像实验及应用本章小结第四章总结与展望论文主要内容和总结创新点展望附录探针的其他图谱附录探针的其他谱图参考文献硕士学位期间完成的科研成果云南大学硕士学位论文第一章前言绪论当物质受到某种波长的光照射时，这些物质就会发射出不同色彩和各种强度的可见光，当该波长的光不再照射时，物质就不再发光，这种冷发光的现象叫做焚光⑴。能发出焚光的物质在我们的生活中随处可见，比如：焚光笔、焚光服、突光灯、焚光棒、钻石和矿物等。要使化合物能够发出荧光，首先要在结构中含有：、、等这些荧光基团。其次，

7、这些荧光基团在整个分子结构中，作为其结构的共轭体系的一个部分，满足这两点，化合物就可能发出荧光。焚光分析法因其具有高灵敏度和选择性被广泛应用。在对微量物质的研究和分析方法中，比色法和分光光度法用的最多，但是他们的灵敏度比起荧光分析法还低其个数量级。焚光分析法受到很多参数的影响，比如：荧光量子产率、发射和激发波长、美光偏振和焚光寿命等等。为了提高这种方法的选择性，可以采用三维扫描光谱、同步扫描、时间分辨和空间分辨这些新的技术和方法来实现焚光分析法的高选择性。荧光分析法不仅有选择性和灵敏度高的优点，它还有较宽的动态线性范围、上样量少、重现性高、操作简单、检测快速等优