不同产地黑茶的化学指纹图谱研究.pdf

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1、万方数据SichuanAgriculturalUniversityADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsforDoctor’SDegreeStudyonChemicalFingerprintingofDarkTeasfromDifferentRegionsHUYan(HorticulturalScience)DirectedbyProf．QiGuinianYa’an，Sichuan，China625014June2014万方数据论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下

2、进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生答名：胡纠学年莎月Io日关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播

3、学位论文的全部或部分内容。日本论文不保密。口本论文保密，在一年解密后适用本授权。(请在以上口内划“√”)研究生签名：谰导师签名：知惮年b月／D同瑚／V年彦月，，口日万方数据捅要黑茶属于后发酵茶，是我国特有的茶类，主产地为湖南、四川、云南、广西、湖北和陕西等省份。过去对黑茶质量的评价主要是测定某些主要指标成分的含量并结合感官审评；近年来，黑茶产品的产量和贸易量不断增加，而不同产地黑茶的质量参差不齐，将化学指纹图谱技术应用于对黑茶的研究能较好地体现黑茶的复杂性和整体性，能为对我国不同产地黑茶的鉴别和质量评价提供参考。因此，本研究以我国6个黑茶主产地的108个黑茶样品为研究对

4、象，采用色谱和光谱分析方法，优化了样品的提取、制备条件和色谱、光谱条件，建立了HPLC．DAD．ELSD同时测定茶叶中11种组分的分析方法，并分别初步建立了我国6个产地黑茶的HPLC—DAD、HPLC．ELSD和FTIR指纹图谱共有模式。主要研究结果如下：1．采用HPLC—DAD—ELSD联用的检测技术，分别初步建立了6个黑茶主产地及我国黑茶的HPLC．DAD和HPLC．ELSD指纹图谱共有模式，其中针对黑茶中氨基酸类等组分紫外响应弱的特点而研究建立的不同产地黑茶的HPLC．ELSD指纹图谱可作为对HPLC—DAD指纹图谱的必要补充。研究了色谱分离条件和样品提取条件的主

5、要影响因素，确定色谱条件为：采用线性梯度洗脱，甲醇和0．1％的三氟乙酸水溶液为流动相，柱温为30℃，DAD检测波长为280nm，流动相的流速为1．0mL／min，ELSD的雾化气体流速为2．8L／min，漂移管温度为110。C；确定用于HPLC指纹图谱分析的黑茶样品提取条件为：用超纯水作为提取溶剂，在90。C水浴下浸提15min，料液比为1：70。方法学考察表明精密度、重现性良好，黑茶样品提取液在24h内稳定。根据平均相对保留时间、共有峰、平均相对峰面积和同源峰等对黑茶的HPLC指纹图谱进行了分析，其中在我国黑茶的HPLC—DAD指纹图谱共有模式中共确定13个共有峰，在

6、我国黑茶的HPLC．ELSD指纹图谱共有模式中共确定10个共有峰，在湖南、四川、云南、广西、湖北和陕西黑茶各自的HPLC．DAD和HPLC．ELSD指纹图谱共有模式中分别确定了3l、29、19、27、26、24个和16、16、12、16、16、18个共有峰；不同产地黑茶中各共有峰的平均峰面积值和平均相对峰面积值均存在一定的差异。运用指纹图谱相似度评价软件对108个黑茶样品与各自相应产地的HPLC指纹图谱共有模式间进行了相似度比较，结果表明，除四川黑茶中的方包茶和湖南黑茶中的青砖茶外，其余102个黑茶样品与各自相应产地的HPLC指纹图谱共有模式间的相似度均高于0．900，

7、而18个对照茶样与我国黑茶HPLC指纹图谱共有模式间的相似度均低于万方数据0．900。利用SPSS统计分析软件对2012年生产的黑茶样品的HPLC．DAD图谱数据进行了聚类分析，结果表明，当临界值为4时，来自不同产地的36个黑茶样品可聚为6大类。2．用茶叶中11种重要生物活性物质的对照品溶液对各产地黑茶HPLC图谱中的一些共有峰进行了指认。本研究中建立的色谱分析方法可用于对茶叶中儿茶素类、CAF(咖啡碱)、氨基酸类、GA(没食子酸)等主要组分的同时分离检测。3．黑茶是一种复杂的混合物体系，采用FTIR对不同产地的黑茶进行研究，所反映的是黑