学案55植物组织培养技术及.doc

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1、学案55植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术【考纲要求11.植物纽织培养技术的应用。2.DNA的粗提収与鉴定。课前准备区

2、回扣教材夯实基础—、植物组织培养1.脱分化：山的植物纟［［织或细胞产生的过程。2.愈伤组织：细胞排列而无规则，是一种的呈的3.再分化：脱分化产生的继续培养，重新分化出和等器官的过程。4.植物组织培养的理论基础：植物细胞的=5.基本过程：离体的植物纽•织空丄—-〜移栽成活二、DNA的粗提取与鉴定1.提取原理：⑴利用DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不同进行分离。在2mol/L的该溶液中溶解而析出，在0.14mol/L溶液中溶解而析出。(2)DNA不溶于酒精，而

3、等杂质分子溶于酒精。2.鉴定原理：在沸水浴条件下，DNA遇试剂会被染成=三、多聚酶链式反应扩增DNA片段1.PCR技术的原理：利用了原理。通过控制來控制DNA双链的解聚和结合。2.PCR反应的条件：一定的,DNA模板，分别与两条模板链札I结合的两种,四种,耐热的，同时控制使DNA复制在体外反复进行。想一想细胞内DNA复制与细胞外DNA复制必需的酶是什么酶？四、血红蛋白的提取和分离1.分离方法——法和电泳法。2.纯度鉴定——一般用方法对■血红蛋白进行纯度鉴定。课堂活动区輕住业魅应探究点一植物的组织培养1.填农比较花粉植株的产生与植物茎的组织培养菊花茎的纽•织培养月季的花药培养理论依据细胞的

4、基本过程脱分化、再分化影响因素选材、营养、、pH、温度、光照等材料选取未开花植株的茎上部新萌生的侧枝通常选择完全未开放的光照状况每日用日光灯照12h开始光照，幼小植株形成后光照操作流程制备MS固体培养基一消毒f接种f〜移栽〜栽培选材f材料消毒f接种和培养f和诱导f移栽f栽培选育结果一植株植株2.生长素和细胞分裂索是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激索，其作用及特点如下表,请补充完整。激素使用实验结果使用顺序先生长素后细胞分裂素有利于细胞先细胞分裂素后生长素细胞生长素与细胞分裂素同时使用分化频率生长素用量与细胞分裂素用量的比例该比值高时利于的分化，抑制的形成该比值低吋利于的分化，抑制的

5、形成该比值适中时促进的生长思维拓展1・实验操作中应注意的儿个问题：（1）材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花药进行培养。⑵外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。（3）培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照，而在后期均需光照。2.花药培养过程中，确定花粉的发育时期可进行镜检，镜检前染色处理，染色方法有醋酸洋红法和焙花青一洛矶法两种，后者能将花粉细胞染成蓝黑色。【探究示例11下列关于植物组织培养的叙述，错误的是

6、（）A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压B.培养基屮的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化C.离体器官或纽织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同听课记录：探究点二DNA的粗提取与鉴定1.简述DNA粗提収与鉴定的基本原理。2.完成该实验的实验步骤与鉴定图衣：⑴步骤：提収血细胞核物质（涨破）〜溶解（2mol/L的NnCl）-＞过滤（除杂质）-4斤出（滴蒸绸水，降NaCl浓度至mol/L）-*过滤再溶解（mol/L的NaCl）~过滤进•步提纯（体积分数为的冷却酒精）一鉴定。（2）鉴定1.本实验用鸡血细胞作实验材

7、料，不能用哺乳动物的成熟红细胞，原因是哺乳动物的成熟红细胞内无细胞核，但它可以作为血红蛋白提取和制备细胞膜的理想材料。2.实验过程中两次用到蒸馅水，第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。3.预冷的酒精溶液具有以下优点：（1）抑制核酸水解酶活性，防止DNA被降解。⑵降低分子运动；易于形成沉淀析出。（3）低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。【探究示例21（2011-江苏卷，19）在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是（）A.用蒸饰水将NnCl溶液浓度调至0.14mol/L,滤去析出物B.调节NaCl溶

8、液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代允鸡血作为实验材料，英实验操作步骤相同听课记录：探究点三PCR扩增技术1.简述PCR原理。2.补充完幣PCR的反应过程(1)当温度上升到90°C纠上时，双链DNA解聚为单链，如下图:；：

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20、睾约95花3'5昇5'3’IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII⑵:温度下降到50°C左右，两种