课题2　月季的花药培养.ppt

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1、专题3植物的组织培养技术课题目标说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。课题重点与难点课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。（一）植物组织培养的基本过程知识要点：1.细胞分化的概念；2.离体植物细胞的脱分化和再分化。（二）影响植物组织培养的因素知识要点：影响植物组织培养的因素有培养基配制、外植体的选取、消毒、接种、培养、移栽和栽培等。二、细胞的全能性Ⅰ、所谓细胞全能性，是指细胞如受精卵一样，具有经过分裂、分化形成各种组织和细

2、胞，最终发育成一个完整的个体的能力。细胞核的全能性并不代表细胞具有全能性。Ⅱ、植物体细胞具有全能性低等动物的细胞和高等动物早期胚胎细胞具有发育全能性高等动物的体细胞核具有发育全能性高等动物的体细胞是否具有全能性？——一个还没有最后结论的话题练习:1、植物学家将胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放在特定的培养基中培养，获得了许多完整的植株，这些植株的特点是()Ａ.彼此性状极为相似Ｂ.都是单倍体植株Ｃ.植株的变异频率较高Ｄ.都是纯合体植株2、根据分裂潜能，干细胞可分为全能干细胞（可发育成完整的个体）、多能干细胞（可发育

3、成多种组织和器官）和专能干细胞（发育成专门的组织和器官），则这些细胞在个体发育中的分化顺序是()Ａ.全能——专能——多能Ｂ.全能——多能——专能Ｃ.多能——全能——专能Ｄ.专能——全能——多能三、植物组织培养的基本过程什么叫细胞分化、脱（去）分化、再分化？如何控制细胞的脱分化与去分化？四、影响植物组织培养的因素1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物：

4、甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等3、不同植物激素使用顺序和使用量4、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因：5、pH、温度、光照菊花：pH=5.8温度控制在18—22℃每日光照12h植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功

5、，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培四、实验操作移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌）2、外植体的消毒（酒精、氯化汞）3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧）4、无菌箱中的培养；5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。思考：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（

6、二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格课题延伸（略）练习1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。植物组织培养技术的应用1.快速繁殖:我国用花药培养法先后培育出优质高产

7、的经济作物、粮食和蔬菜等新品种，广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。2.借助于组织培养生产人工种子，解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。(培养到胚状体)3.生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。(培养到愈伤组织)4.转基因植物的培育5.无病毒植株的培育（取根尖、茎尖培育）21.下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：①②③练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1）①表示__________________，它能被培养成为④的根本原因是___________

8、__________________________。（2）②表示____________，它与①相比分化程度____________，全能性____________。（3）若想制成人工种子，应选用____________。（4）若①是花药，则④是____________，继续对其使用____________处理可获得______