课题2　月季的花药培养.ppt

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1、月季的花药培养重庆两江育才中学毛述权现在有两个玉米的品种紫色不甜的玉米(AABB)和白色甜玉米（aabb）如果想要用常规的育种方法，如何培育出来纯种的紫色甜玉米（AAbb）？课题2月季的花药培养4花丝花药：囊状结构，内有很多花粉花粉是由花粉母细胞（小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。（提示：精子是由精母细胞经过减数分裂发育而来的；卵细胞是由卵母细胞经过减数分裂发育而来的）（一）被子植物的花粉发育雄蕊被子植物花粉的发育过程是怎样进行的？（一）被子植物的花粉发育被子植物花粉的发育过程小孢子母细胞4个小孢子（小孢子四分体时期）1个小孢子（单核居中期）1个小

2、孢子（单核靠边期）花粉管细胞核生殖细胞核营养细胞生殖细胞精子精子减数分裂有丝分裂有丝分裂特点：细胞质浓厚小孢子母细胞4个小孢子（小孢子四分体时期）1个小孢子（单核居中期）1个小孢子（单核靠边期）花粉管细胞核生殖细胞核营养细胞生殖细胞精子精子减数分裂有丝分裂有丝分裂问：（1）如果小孢子母细胞染色体数为2n，则小孢子四分体时期、单核期、双核期阶段中细胞核中染色体的数目变化？（2）成熟的花粉粒有几个细胞？9练习：1.某高等植物体细胞内假设有6条染色体，它们是AaBbDd，那么，一个花粉管中的两个精子中的染色体是（）A．ABD和abdB．AbD和abdC．AaB和BbdD．Abd和Abd

3、2.基因型为AaBb的一个小孢子母细胞经减数分裂形成的一个花粉粒中的一个营养核和两个精子，其基因型分别是（）A．AB、Ab、AbB．AB、AB、ABC．AB、aB、aBD．aB、ab、abBD10花粉是如何长成新的植株的？（二）产生花粉植株的两种途径移栽胚状体愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根注：两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。（三）影响花药培养的因素亲本植株的生长条件（温度、水、P

4、H值）；材料的低温预处理；接种密度……培养基的组成（营养物质）；材料的选择；（三）影响花药培养的因素培养基的组成月季花药培养基配方i在1000mLMS培养基配方中添加2,4-D0.4mgKT0.2mgIAA4mg调节pH至5.8（三）影响花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择（三）影响花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择花期指在一个生长季节内植株开花的时间段。例如：某些种类月季从5月一直到11月连续开花5月就叫做该种月季的初花期或花期早期（三）影响花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择初花期（三）影响花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择初花期（三）影响

5、花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择初花期单核期（细胞核由中央移向细胞一侧）单核期以前的花药接种质地幼嫩，极易破碎；单核期以后的花药接种，花瓣已有松动，给材料消毒带来困难。为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。（三）影响花药培养的因素花期：花粉：花蕾：材料的选择初花期单核期（细胞核由中央移向细胞一侧）完全未开放22（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养23（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养选择花粉的发育期：单核期通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期最常用的方法——醋酸洋红若遇到某些花粉细胞不易

6、着色时采用焙花青-铬矾法这种方法能把花粉细胞核染成蓝黑色24（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养1.将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s2.无菌水清洗3.无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4.放入质量分数为0.1%的氯化汞溶2~4min（也可质量分数为1%的次氯酸溶液或饱和漂白粉溶液）5.无菌水冲洗3~5次25（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。

7、通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。一般经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。26（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养最后需对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选。为什么？在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。（主要原因是营养核和生殖核融合造成的。）27（四）实验操作材料的选取材料的消毒接种和培养