普通微生物学第六章.ppt

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1、第六章微生物的生长繁殖及其控制第一节微生物生长的测定微生物生长的概念及常规测定方法（原理和操作）第二节细菌的群体生长繁殖细菌生长繁殖的规律（标准生长曲线）及控制技术（连续培养的概念和方法）各种常见物理、化学因素对微生物生长的影响第三节微生物生长繁殖的控制生长：繁殖：细胞物质有规律地、不可逆地增加，导致细胞体积扩大的生物学过程。微生物生长到一定阶段由于细胞结构的复制与重建并通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。参见P132生长是一个逐步发生的量变过程，繁殖是一个产生新的生命个体的质变过程。在高

2、等生物里这两个过程可以明显分开，但在低等特别是在单细胞的生物里，由于个体微小，这两个过程是紧密联系又很难划分的过程。参见P132一个微生物细胞合适的外界条件，吸收营养物质，进行代谢如果同化作用的速度超过了异化作用个体的生长原生质的总量（重量、体积、大小）就不断增加如果各细胞组分是按恰当的比例生长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，引起个体数目的增加群体内各个个体进一步生长群体的生长个体生长个体繁殖群体生长群体生长=个体生长+个体繁殖微生物生长：在一定时间和条件下，细胞数量的增加（微生物群体生长）在微生物学中提到的“生长”，

3、一般均指群体生长，这一点与研究大生物时有所不同。大肠杆菌一个细胞重约10-12克，平均20分钟繁殖一代24小时后：4722366500万亿个后代，重量达到：4722吨48小时后：2.2×1043个后代，重量达到2.2×1025吨相当于4000个地球的重量一头500kg的食用公牛，24小时生产0.5kg蛋白质，而同样重量的酵母菌，以质量较次的糖液（如糖蜜）和氨水为原料，24小时可以生产50000kg优质蛋白质。第一节微生物生长的测定微生物生长的概念及常规测定方法（原理和操作）微生物生长：单位时间内微生物数量或生物量（Bio

4、mass）的变化微生物生长的测定个体计数生物量测定重量测定生理指标测定评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；评价不同的抗菌物质对对微生物产生抑制（或杀死）作用的效果；客观地反映微生物生长的规律；参见P151一、计数法参见P152通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。1、培养平板计数法对样品进行适当稀释单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖肉眼可见的菌落对菌落数目计数推测样品中的微生物细胞数由于无法保证细菌细胞在分离过程中彻底分开，因此，一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一

5、般用菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）来表示，而不是直接表示为细胞数（个）。菌落形成单位（colonyformingunits，CFU）：采用菌落计数时，由于不能绝对保证一个菌落只是由一个活细胞形成，计算出的活细胞数称为CFU。CFU并不完全等同于样品中的活菌数。采用培养平板计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确的结果；样品充分混匀；每支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液；同一稀释度三个以上重复，取平均值；每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数；2、膜过滤培养法如何对菌数低的样品，如水，

6、中的细菌数量进行计数？菌数低的样品膜过滤培养菌落计数参见P153水中细菌总数：124cfu/100ml3、显微镜直接计数法利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。参见P1521）常规方法缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对较高的细菌浓度；个体小的细菌在显微镜下难以观察。2）其它方法比例计数:已知浓度的样品（如血液）+待测浓度的样品；显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。过滤计数:菌数低的样品（如水）膜过滤对细菌进行荧光染色荧光显微镜计数活菌计数

7、:采用特定的染色技术对活菌和死菌分别计数二、生物量测定1、比浊法在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度（opticaldensity，即O.D.）表示菌量。测量时应控制在菌浓度与光密度成正比的范围内，否则不准确。参见P1532、重量法以干重、湿重直接衡量微生物群体的生物量；通过样品中蛋白质、核酸的测定间接推算微生物群体的生物量。测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法参见P1533、生理指标法参见P154生理指标：呼吸强度耗氧量酶活性生物热等，与其群体的规模成正相关第二节细菌的群体生长繁殖细菌生长繁殖的规律（标准生长曲

8、线）及控制技术（连续培养的概念和方法）参见P134微生物的特点：个体微小除真菌外，我们肉眼看到或接触到的微生物已不是单个，而是成千上万个单个微生物组成的群体。微生物的接种是群体接种，接种后的生长是群体繁殖生长对细菌群体生长规律的了解是对其进行研究与利用的基础参见P134一、生长的规律在微生物学中提到的“生长”，均指群