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《鱼类嗅觉上皮细胞免疫荧光标记研究【开题报告】》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文开题报告生物工程鱼类嗅觉上皮细胞免疫荧光标记研究一、选题的背景与意义自然界中存在大量的气味成分，为什么动物能感受到这些气味呢？为了揭示这个秘密，很多研究者已经开对嗅觉系统进行系统地研究，包括从哺乳动物到鱼类，都做了大量的研究。由于嗅觉受体是G蛋白耦合受体，目前已经有人用哺乳动物的G蛋白制备的抗体可以在鲶鱼与金鱼的嗅觉神经元细胞中检测到。大黄鱼是我国特有的经济鱼类，属于海洋性鱼类，本研究通过免疫荧光的方法对大黄鱼的嗅觉神经元进行G蛋白检测，观察三类G蛋白在大黄鱼嗅觉神经元细胞中的分布情况。了解大黄鱼嗅觉神经元细胞的内部结构与特点，从而对大黄鱼摄食生理学提供理论基础。
2、二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：（一）基本内容：本实验通过对鱼类嗅觉器官尤其是大黄鱼嗅觉器官的解剖及观察，并通过免疫荧光标记法检测大黄鱼的嗅觉神经元中是否含有与以下三类嗅觉神经元：纤毛嗅觉神经元、微绒毛嗅觉神经元、隐窝嗅觉神经，有关的气味受体及G蛋白。（二）拟解决的主要问题1、细胞组织的冷冻包埋方法2、冷冻切片的技术应用3、免疫荧光反应的实际操作4、嗅觉神经元G蛋白的研究5、观察实验结果后，与鲶鱼嗅觉组织进行比对，总结异同三、研究的方法与技术路线：研究方法：本实验应用4%的多聚甲醛（PFA）对已经采集到的嗅觉器官固定后，用冷冻包埋剂（OCT）低温中包埋。然后应用冷冻
3、切片技术将处理好的嗅觉组织切成10-20微米的片状。最后通过免疫或发反应，利用一抗与二抗的孵育并通过DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚)细胞核负染。最后在荧光显微镜下拍照观察。技术路线：1、样品的采集2、嗅觉器管解剖分离3、采集嗅觉器官固定、包埋4、冰冻切片5、免疫组化反应6、荧光显微镜拍照四、研究的总体安排与进度：2010年9月—10月：查阅文献，收集相关资料2010年10月—11月：设计实验的宏观设计路线，制定大体实验步骤2010年11月—2011年2月：进行试验，收集实验数据2011年2月—4月：数据整理，总结实验，论文写作五、主要参考文献：[1]Adrian,E
4、.D.,1951.Thesenseofsmell.Med.J.Aust.2,170.[2]Buck,L.,Axel,R.,1991.Anovelmultigenefamilymayencodeodorantreceptors:amolecularbasisforodorrecognition.Cell65,175–187.[4]Zou,Z.,Horowitz,L.F.,Montmayeur,J.P.,Snapper,S.,Buck,L.B.,2001.Genetictracingrevealsastereotypedsensorymapintheolfactorycort
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