纳米TiO2对斑马鱼肝损伤基因表达的影响【毕业设计】

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1、本科毕业设计（20__届）纳米TiO2对斑马鱼肝损伤基因表达的影响目录1引言12材料与方法12.1实验材料12.1.1动物材料12.1.2主要试剂12.1.3主要设备22.2实验方法22.2.1斑马鱼的驯养22.2.2斑马鱼的染毒处理22.2.3斑马鱼总RNA的提取22.2.3.1使用Biozol试剂提取RNA22.2.3.2总RNA完整性检测32.2.3.3总RNA浓度及纯度分析32.2.4RT-PCR扩增32.2.4.1RT-PCR反应体系32.2.4.2PCR反应条件32.2.4.3扩增产物的检测42.3数据处理43结果43.1斑马鱼

2、肝总RNA完整性检测43.2总RNA的浓度及纯度检测53.3纳米TiO2对各基因表达的影响53.3.1纳米TiO2对ACTIN基因表达的影响53.3.2纳米TiO2对CTR1基因表达的影响53.3.3纳米TiO2对MTF-1基因表达的影响63.3.4纳米TiO2对NKA基因表达的影响73.3.5纳米TiO2对HSP70基因表达的影响83.3.6纳米TiO2对HIF基因表达的影响94分析与展望104.1纳米TiO2对斑马鱼肝CTR1基因表达影响的机理分析104.2纳米TiO2对斑马鱼肝MTF-1基因表达影响的机理分析104.3纳米TiO2对斑

3、马鱼肝NKA基因表达影响的机理分析114.4纳米TiO2对斑马鱼肝HSP70基因表达影响的机理分析114.4纳米TiO2对斑马鱼肝HIF基因表达影响的机理分析114.5展望12参考文献14摘要：为探讨纳米TiO2（Nano-TiO2）颗粒对斑马鱼（Daniorerio）肝损伤相关基因表达的影响，选取浓度为5.6mgL-1的TiO2培养斑马鱼，运用半定量RT-PCR技术分析相关基因在不同处理时间（6h，12h，24h，48h，72h）的表达量。共检测了HSP70（heatshockprotein，热休克蛋白）、HIF(hypoxiainduc

4、iblefactor，低氧诱导因子)、CTR1（coppertransporter1，铜离子转运蛋白）、MTF-1（metal-responsivetranscriptionfactor-1，金属调节转录因子）、NKA（Na+-K+-ATPase，钠钾ATP酶）。实验结果显示，纳米Ti02对CTR1基因的表达影响不显著，而对其他相关基因表达有着较明显的影响，并且对不同基因的表达的影响呈多样性。本研究旨为深入研究鱼类基因表达与重金属解毒分子机制间的关系，以及为研究纳米材料毒理奠定基础。关键词：纳米TiO2；肝损伤；基因表达Abstract:T

5、oinvestigatetheexpressionofzebrafish(Daniorerio)generelatedtoliverinjuryundertheinfluenceofNano-TiO2particles.UsingNano-TiO2particleswithconcentrationof5.6mg·L-1tofeedzebrafishandUsingSemi-quantitativeRT-PCRtechnologytoanalysistheexpressionofassociatedgenesindifferenttime(

6、6h,12,24h,48h,72h).Intotal,HSP70(heatshockprotein),HIF(hypoxiainduciblefactor),CTR1(coppertransporter1),MTF-1(metal-responsivetranscriptionfactor-1)andNKA(Na+-K+-ATPase)werechecked.ExperimentalresultsshowedthatNano-TiO2particleshavenosignificanteffectonCTR1gene.ButNano-TiO

7、2Particleshaveasignificanteffectontheexpressionofothergenes.Theeffectontheexpressionofdifferentgeneswasdiversity.Thisstudyisdesignedforin-depthstudyoftherelationshipsbetweenthegeneexpressionoffishandheavymetaldetoxificationmolecularmechanismsandtolaythefoundationfornanomat

8、erialstoxicity.Keywords:Nano-TiO2;liverinjury;geneexpression1引言纳米是英文namometer的译音，是一个物理学上的