资源描述：
《治疗心血管疾病药物的药效学研究方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、治疗心血管疾病药物的药效学模型及评价方法进入21批纪，心血管疾病已超过恶性肿瘤成为威胁人类生命的头号杀手。心血管药物对增进健康，改善生活质量和延长寿命有着重要的意义。白20世纪八十年代中期，心血管药物就步入其研制开发的黄金阶段。进入本世纪，其主导地位更是不可替代。心血管药物是世界范围内用量最多，俏售额最人的一类治疗药物，一直稳居各类药物Z首。心血管药物也是新药研究中最为活跃的一个领域。据统计，平均每年进入临床研究的此类新药约有20余种，使心血管疾病的药物治疗达到了较高的水平。1.抗高血压药物的药
2、效学模型及评价方法高血压的致病因子及其发病机制尚未十分清楚，但已知体内许多系统与血压的调节有密切关系，包括中枢神经系统，肾上腺素能神经，肾素■血管紧张素■醛固酮系统(RAAS),血管舒张肽■激肽■前列腺素系统，血管内皮松弛因子•收缩因子系统等。高血压述会起心、脑等重耍器官损伤症，因此抗高血压药物研究时降低血压作用仅为指标2—，而减少器官损伤，特别是减少或逆转左心室肥厚也是研究的重要指标。1.1肾血管性高血压大鼠模型的复制(也可直接购买自发性高血压大鼠)健康大鼠，腹腔注射麻醉，仰卧固定，腹部剪毛消
3、毒处理，腹正中线切口，钝性分离左肾动脉，取直径约0.3mm的钢丝平行放置肾动脉处，用细线结扎后，抽出钢丝，左肾动脉造成部分狭窄，右肾动脉保持不动，缝合肌肉与皮肤,消毒处理，术后常规注射青每素3犬，自由进食饮水，5周后大鼠血压＞20kPa(150mmHg)者为造模成功。1.2药物的降压作用探讨选高血•压大鼠，实验前1周每天定时测量血压1次，其均值作为药前值。于给药后0.5,1,1.5,2,3,4,6,8,12h及1,3,6,10,14d及停药后3,7d在动物处于清醒状态厂通过小动物血压测量器测量鼠
4、尾动脉血压，评价药物的降压效果。1.3药物防治左室肥厚的作用及各项指标测定大鼠断头处死，取心脏去除血液，滤纸吸干，称全心重；分离左心室，保留室间隔，称左心室重，计算心肌重量指数：全心重/体重、左室重/体重。心室肌SOD含量测定：取左心宗肌，冷生理盐水冲洗，置于生理盐水中制成10%的组织匀浆，4°C26000rpm离心30min,取上清液，试剂盒测定SOD。心室肌MDA含量测定：取左心室肌，置于冷生理盐水屮制成10%组织匀浆，试剂盒测定MDAo心肌NO含量测定：取左心室肌，置于冷生理盐水屮制成10
5、%组织匀浆，1000rpm离心5min,取上清液，试剂盒测定NO。左心室肌Ca2+含量测定：取左心室肌300mg,加入硝酸和高氯酸混合液（4:1）3mL,与通风橱内加热湿消化、蒸干、冷却后加入3mL无离子水定容,取定容液加释放剂總（始浓度为2mg/mL）,原了吸收分光光度计测定Ca2+含量。心肌纤维直径测定：取左心室肌，中性福尔马林固定，常规石賭包埋，制成10nm厚切片，HE染色，显微镜下放大400倍，每个标本计数20根肌纤维,取平均直径。1.4中枢性与外周性降压机制的分析猫腹腔注射麻醉后，仰卧
6、固定于手术台上，颈部除毛，颈下部切口找出右颈总动脉，向下追踪到锁骨下动脉，结扎具上覆盖的颈外静脉切断，在其向内转弯处向下分离，可见发自锁骨下动脉的右椎动脉，结扎锁骨卞动脉分支及远心端，分离左颈动脉插管，连接电生理系统记录给药前后血压值。1.5神经节阻断试验猫腹腔注射麻醉，仰卧固定于手术台上。颈部正中切开皮肤，分离并插入气管插管，依次分离出右侧颈总动脉、外颈动脉、舌动脉。舌动脉插管，以备给药。外颈动脉夹动脉夹，将猫头固定，丝线一端穿过瞬膜边缘结扎系住，另一端连接在张力换能器上，由电生理仪引出刺激电
7、极，与交感神经节前纤维和节后纤维分别连接，调节刺激参数为:连续A、波宽0.7ms,频率I0H乙电压4V,同时观察瞬膜变化（刺激节前纤维，观察瞬膜收缩反应；刺激节后纤维，观察瞬膜收缩反应）。1.6c（受体拮抗试验兔颈动脉插管，电生理系统记录血压，股静脉注射肾上腺素0.1mL,Ifn.压上升达稳定后记录血压升高幅度。血压恢复正常后给予药物，再次注射肾上腺素0.1mL,血压稳定后记录血压升高幅度。1.7P受体拮抗试验兔颈动脉插管，电生理系统记录血压，股静脉注射异丙肾上腺素0,1mL,血压上升达稳定后记
8、录血压升高幅度。血压恢复正常后给予药物，再次注射异内肾上腺索0,1mL,血压稳定后记录血压升高幅度。1.8利尿试验雄性大鼠，预先置于代谢笼中1d适应环境，观察口出饮水条件來量是否稳定。试验前18h禁食不禁水，应用Aston利尿筛选法，用药前按体重灌注去离子水2.2mL/100g,使实验动物体内水平衡。收集2h尿液，凡尿量超过40%水负荷者，可继续进行试验，对照组人鼠灌以1%生理盐水，试验组人鼠灌注含有药物的等量溶液，每小时收集尿液一次，连续观察6h。1.9对RAAS的影响去甲肾上腺素(NE)测定
