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1、第29卷,第2期光谱实验室Vol.29,No.22012年3月ChineseJournalofSpectroscopyLaboratoryMarch,2012¹7种常见食用菌中多糖的提取和测定º李承范(延边大学分析测试中心吉林省延吉市公园路977号133002)摘要采用热水提取、乙醇沉淀的方法从7种食用菌中提取出了水溶性多糖,采用蒽酮-硫酸法在波长620nm处进行了糖含量的测定,求得其校准曲线的回归方程为y=0.0094x+0.0057,相关系数r为0.9998。平均回收率为98.3%—102.7%,RSD为2.1%—3.2
2、%。结果显示粗多糖的提取率为4.44%—16.75%,多糖含量为3.48%—6.91%。关键词食用菌;水溶性多糖;提取;蒽酮-硫酸法中图分类号:O657.32文献标识码:B文章编号:1004-8138(2012)02-0996-041引言多糖由10个分子以上的单糖通过糖苷键连接而成的天然高分子化合物,广泛存在于植物、动[1]物和微生物组织中。近20年来,由于分子生物学和细胞生物学的发展,发现多糖及缀合物参与了细胞中的各种生命活动,具有多种生物学功能,引起人们极大的兴趣,成为研究的热点,而其中最为[2]人们关注的就是食药用真菌
3、多糖的研究。[3]双胞子蘑、木耳、平菇、滑子蘑、榆黄蘑、香菇和猴头菇是日常生活中比较常见的食用菌,都含有比较丰富的营养物质和多糖类物质。实验表明,食用菌中的多糖类物质是食用菌免疫活性和抗衰[4]老的有效成分之一,可通过淋巴细胞、巨噬细胞、网状内皮系统的作用而调节机体的免疫功能,提[5]高身体抵抗病毒和细菌入侵的能力。具有抗脂肪肝和高血脂、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤、抗炎及血[6]管保护等作用而倍受关注。为了进一步开发利用食用真菌资源,发挥其潜在的经济价值和药用价值,本文研究了双胞子蘑、木耳、平菇、滑子蘑、榆黄蘑、香菇和猴头菇中多
4、糖的提取和测定方法,对进一步开发食用菌资源,具有重要的意义。2实验部分2.1仪器与试剂RE-52CS1型旋转式蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SP210S型电子天平(北京赛多利斯天平厂);U-3400型紫外可见近红外光谱仪(日本日立公司)。蒽酮(AR,沈阳国药集团化学试剂有限公司);95%乙醇(AR)、浓硫酸(AR)、葡萄糖(AR)、石油醚(AR)、乙醚(AR)、三氯乙酸(AR)(以上均为天津科密欧化学试剂有限公司)。实验用水为二次¹吉林省教育厅科技计划项目:吉教科合字[2009]14号º联系人,电话:(0433)273306
5、2;传真:(0433)2732207;E-mail:yjhxlcf@ybu.edu.cn作者简介:李承范(1958—),男(朝鲜族),吉林省延吉市人,副教授,主要从事光谱分析的教学与科研工作。收稿日期:2011-04-19;接受日期:2011-05-11第2期李承范:7种常见食用菌中多糖的提取和测定997蒸馏水。7种食用菌双胞子蘑、木耳、平菇、滑子蘑、榆黄蘑、香菇和猴头菇均由吉林省延吉市西市场采购。标准葡萄糖溶液的配制:准确称取105℃干燥至恒重的分析纯葡萄糖对照品100mg(称准至0.0002g),用少量水溶解,转移至10
6、0mL容量瓶中,用水定容,配制成1mg/mL的标准溶液。取25mL1mg/mL的标准溶液用水定容至500mL,溶液的浓度为50Lg/mL。0.2%蒽酮溶液:准确称取0.2g蒽酮溶于100mL浓硫酸中,当日配制使用。2.2实验方法[7]2.2.17种食用菌多糖的提取和纯化分别准确称取风干粉碎至60目的7种食用菌样品20g(准确至0.0002g),用脂肪提取器石油醚回流抽提除去脂肪,抽滤,干燥。取脱脂的样品以m(干粉)∶m(蒸馏水)=1∶25的比例加入二次蒸馏水,提取温度为90℃,提取时间3h,提取次数3次。合并提取液用旋转蒸发
7、仪浓缩至25mL左右。用其5倍体积约125mL95%的乙醇沉淀,密封放置24h。过滤(用沙芯漏斗抽滤),抽干,10mL水复溶,加入3%三氯乙酸至不再产生白色沉淀为止,除去蛋白质,溶液浓缩,加入125mL乙醇醇析,静置过夜,抽滤,分别用乙醇10mL洗两次、用乙醚10mL洗1次,干燥得粗多糖。[8]2.2.2校准曲线的绘制取7支10mL刻度试管,按表1数据配制。在每支试管中立即加入蒽酮试剂8.0mL,迅速放入冰水浴中冷却,各管加完后一起放入沸水浴中,管口加盖,以防蒸发。自水沸腾起计时,准确煮沸10min。取出,用冰浴冷却至室温,
8、在620nm波长下以第一管为空白,迅速测其余各管吸光度值。以标准葡萄糖含量为横坐标,以吸光度为纵坐标,绘出校准曲线,见图1。从图1得到回归方程:y=0.0094x+0.0057。在0—80.0Lg/mL范围内,线性关系良好。图1葡萄糖校准曲线表1葡萄糖标准溶液的配置和吸光度(n=3)序号1
