2019高考生物二轮复习 大题提升八 生物技术实践

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1、八、现代生物科技专题1．[2018·全国卷Ⅰ]回答下列问题：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了____________________________(答出两点即可)。(2)体外重组的质粒可通过Ca2＋参与的______________方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与_____________组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿

2、主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是______________。(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用______________的大肠杆菌作为受体细胞，在蛋白质纯化的过程中应添加______________的抑制剂。2．[2018·全国卷Ⅱ]某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接在GFP

3、基因的5′末端，获得了L1－GFP融合基因(简称为甲)，并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1～E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：(1)据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是________。使用这两种酶进行酶切是为了保证________，也是为了保证________。(2)将P1转入体外培育的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了________和________过

4、程。(3)为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的________移入牛的________中、体外培养、胚胎移植等。(4)为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定，在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的________(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。3．[2018·全国卷Ⅲ]2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题：(1)“中

5、中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指__________。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目________(填“减半”“加倍”或“不变”)。(2)哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度________(填“大于”或“小于”)体细胞核移植，其原因是____________________________。(3)在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞

6、的常染色体数目________(填“相同”或“不同”)，性染色体组合________(填“相同”或“不同”)。4．[2018·江苏卷]为生产具有特定性能的α淀粉酶，研究人员从某种海洋细菌中克隆了α淀粉酶基因(1656个碱基对)，利用基因工程大量制备α淀粉酶，实验流程见右图。请回答下列问题：(1)利用PCR技术扩增α淀粉酶基因前，需先获得细菌的________。(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接，需在引物的________端加上限制性酶切位点，且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要

7、目的是________。(3)进行扩增时，反应的温度和时间需根据具体情况进行设定，下列选项中______的设定与引物有关，________的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)①变性温度　②退火温度　③延伸温度　④变性时间　⑤退火时间　⑥延伸时间(4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：图中虚线框内mRNA片段包含________个密码子，如虚线框后的序列未知，预测虚线框后的第一个密码子最多有________种。(5)获得工程菌表达的α淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓

8、度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性，结果如下表所示：缓冲液50mmol/LNa2HPO4－KH2PO450mmol/LTris－HCl50mmol/LGly－NaOHpH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5酶相对活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8　根据上述实验结果，初步判断该α淀粉酶活性最高的条件为________。5．[2018·河北武邑中学调