DB1304∕T 126-2003 草莓脱毒育苗技术规程

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1、I305DB邯郸市士也方标准1)川30411'120-2003草莓脱毒育苗技术规程2003-10-1发布2003-10-10实施1邓单阝市质量技术监督局1)D1304八'126-2003．毛左．～J‘．月Ii青木标准2003年10月1日首次发布本标准！I-1成安县草莓协会提出本标准起草单位：成安县草莓协会成安县技．术监督局木标准主要起草人：杨建军杨峰梁领军刘建民范振海中光辉IN弓1.304厂1'126－一‘）（）3莓脱毒育苗技术规程范用本标准规定了草薄脱毒育苗技术的灭菌、育苗、移栽及林苗后初期管理。水标准适用1-.

2、在．入:1'.控制的环崦‘卜进行的草荀幕尖脱毒育苗．2定义2.1脱毒育苗〔组织培养简称组培）植物州织培养是指在无菌条件.F.将离I水的桥物器官、川川、细欣以．及原生项休．济作在人1-控制的环境中使其形成完撰的植株．2.2有菌指暴露在空气中或曾经接触过自然水源的物体表面．在自然条件下形成的或附带的细菌．2．3无菌经物理灭菌法或化学灭菌法处理过的物体，2.441理灭菌指利用高温、射线等杀菌或滤膜过滤除菌等物理拱旅而进行的灭菌．主要包括：千热、湿热、射线、超声孩、流休过滤等除菌技术拮施．2．5化学灭筒指利用各种化学药剂，

3、杀灭细菌的技术措施．常用的灭菌剂有：氛化汞、福尔马林，双氧水、来苏水等。3灭菌3．它洗涤3.1.1昌洗洛的器In、用具洗涤用1%稀盐酸或洗衣粉，肥皂将可溶性无机物除去然后用清水洗净．3.1.2不易洗涤的器皿用具洗涤IN弓1304/'1'126-20033．节．2二配制洗液称4()g工业用策铭欣钾加入IOOrl水『11，加热致移解然后冷却，再慢慢注入浓流赦800m,边加边搅拌，3.1.2.2洗涤方法将特洗的器具、用具浸泡在洗液中，浸泡时间不低于刁小时，再用清水冲洗千净，在洗涤过程中应防止洗液戮到衣服和皮肤上损坏衣服或

4、灼伤皮肤．3.2接种用具灭菌3.2.1接种玻摘、金属用具灭蔺，育使用千烘法灭菌，把器皿或用具放胃在电热烘箱或纤外线千澡箱内干烘，保持Ell度170'(,'干烘2小时，玻嘀器具还可用高Ifs.蒸汽灭前．3.2.2接种常用金属器械（如：刀、剪、摄子等）灭菌，在使用前应用70%酒精棉球仔细擦净，浸泡在70%酒fl中，使用时先在酒精灯外焰上灼烧，特冷却后使川。3.2.3接种服、相子，口革灭菌用高温、湿热法灭菌，将洗净晾千的衣、相.Ll甲用纸包好后放入高压灭菌锅中，待漏度达到121IC.湿度达到100%,压力达到1.05翻r

5、。时，灭菌30分钟．3.3培养基灭菌3.3.1At1.A*基it质灭蔺用高压燕汽灭菌法灭菌，将耐热培养鹅物质置于高1灭蔺锅中，当温度达到121'C,压力达到0.105?pa时，灭菌15分种至40分种。3.3.2不耐热培养其物质灭菌应采用过馆灭菊法灭菌，将固体物质叉．入溶器内然后向溶器内加水，边加边搅拌，加水至固体物质充分溶解，将溶液用目滤网过滤，液休物质直接用滤网过滤。3.4*4材料的表面灭菌3.4二冲洗3.4.1.1将采来的植物材料除去不用的部分，用软毛刷或毛笔轻轻刷洗干净，置于烧怀中加入清水，用木棒轻轻揽拌或直

6、接用流水冲洗．DI弓I304/TI26-20033.4.1.2将清洗干净的植物材料胃入每loomL加40g洗衣粉的洗衣粉治液中．用木棒轻轻搅拌5分钟．再用清水冲洗下净．3.4.2表面灭苗3.4.2.，工作人员换＿眨:1：作服，戴上：l：作帽，用肥皂洗手至肘部，然后用清水冲净，擦干，再用709M"J*擦手至别103.4.2.2将处理好的植物材料和接种用具、灭苗溶液、无蔺水、空烧杯、持用培养纂等哭T无菌工作台＿L:种箱中。3.4.2.3把沥千的植物材料转放到灭过菌的花角瓶或了．‘LI瓶Ili,倒入0.1%级化汞溶液或2

7、0%新洁尔灭溶液，轻轻摇动三角瓶或1.’Li瓶灭菌7分钟一R分钟．3.4.2.4在灭菌时间大于7分钟，小于吕分钟时，将灭菌溶液倒出，倒出灭菌溶液不得倒出植物材料。然后立即倒入无菌水轻轻摇动冲洗，每次冲佚3分钟，冲洗3-10次。4接种4.1接种前准备在接种前10分种，工作人员穿戴好工作服、1作帽，然后用70%酒精擦试工作台和双手。将经过灭菌处理的植物材料和接种用具放叉T作台上，将特用试管或三角瓶，水平拿着靠近酒精火焰上烤10-15秒钟。4.2选材应选用生长R天一10天的苹尖或浩取休眠的苹段经．入一1.催芽15天的顶芽

8、和腋芬。4.3接种将经过表面灭菌茎尖材料在解All镜一F，用解刘针一层一层地仔细剥离叶片，．直到暴甜出圆滑生长点，用锋利的解#I)刀小心切取0.59．大小的带I-2个叶原基的茎尖，然后用右手拿镊子夹住送入试管轻轻插入培养签I，放入培养室进行培养，镊子灼烧后放回架．L．4.4培养IN弓1304/'1'126-2003将接种的茎尖放在温度为25℃．光照I000I