用于实验室诊断病料采集规程

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1、猪病料采集操作规程1病料采集工具的准备EP管、剪刀、蹑子、手术刀、样品袋、酒精棉、酒精灯、选择性培养基、无菌医用棉签、生理盐水、保鲜膜、冰袋（可用矿泉水瓶自制）、保温箱（泡沫箱）、医用手套、口罩，以上工具能灭菌的都灭菌。2疑似细菌性病料的采集、保存和运输细菌的实验室诊断主要包括细菌的分离培养、药敏试验、RT-PCR检测等，通过检测，我们能准确地知道是什么原因造成病情不能控制，通过药敏试验告诉我们什么药物敏感，治疗效果明显。在选择细菌性疾病检测病料时，要选择有代表性的病例，最好是未经抗生素治疗的病例，而且在采集病料前，最好是活体

2、动物。2.1病料采集部位2.1.1呼吸困难、咳嗽、打喷嚏病例的病料采集采集病料吋选取鼻腔粘液及鼻拭子、整个肺脏以及临床剖检的病变组织。2.1.2腹泻病例的病料采集样品采集可用无菌医用棉签伸入直肠蘸取后放入灭菌EP管屮，也可取小段肠道，两端结扎。2.1.3神经症状和步态不稳病例的病例采集可采集大脑组织、关节液以及临床剖检的病变组织。2.1.4精神、食欲不佳、发热和皮肤病病例的病料采集可直接采血送检，有肉眼可见皮肤病如疹块等，切开疹块挤出血液或渗出液送检。2.2具体的采集方法对于鼻腔黏液、新鲜粪便、关节液、血液等不需要解剖采样的病

3、料，尽量在无菌条件下采；有条件且需要解剖采集病变组织的，整个采集过程尽量保证无菌，采集3-4cm3的病变组织，采集病料前先放血，从大腿内侧将皮肤、肌肉切开，直接将股动脉割断，放血至病猪休克死亡。“、鼻腔黏液的采集：用无菌医用棉签伸入病猪鼻腔中，充分刮擦后放置于一个灭菌的EP管中,并做标记。b、胸腔积液和心包积液的采集：用手术刀或剪刀切开胸腔或心包，尽量避免接触污染,用一次性注射器抽取几毫升积液放入EP管中并做标记。c、肺脏釆集：用手拉住气管切口将整个肺脏拉出，背面向上，割取介于病变和正常组织之I'可的部分放置于干净的样品袋中并

4、标记。d、肝脏采集：打开腹腔靠近膈肌位置，从肝脏与消化道连接处将肝脏提起并取出，再病变与正常组织结合部取一块放置于干净的样品袋屮并标记。e、脾脏采集：沿腹中线打开腹腔，在腹腔左侧胃和冋肠下面找到脾脏，小心摘取，放置于干净的样品袋中并标记。f、关节液采集：用酒精棉对关节肿大部位消毒，用一次性注射器抽取几毫升关节液放入EP管中并做标记。g、肠道及内容物采集：取小肠一段道，两端结扎，剪下放入样品袋并做标记。h、神经系统样品采集：用手术刀剥离头皮，凿开头盖骨，将大脑取出放置于干净的保鲜袋中并做标记。2.3病料的运输用于细菌分离的病料，

5、最好是现场采集现场分菌。没条件现场分菌的，必须新鲜运输,整个运输过程病料始终处于低温状态，但不能结冰，尽量减少人为污染。保持病料低温最好用专用冰袋，没有冰袋的可以用矿泉水瓶装水自制冰块。病料运输时将足够的冰块和病料一起放置在保温箱中，冰块将病料包裹，如果冰块不够则将冰块放置在病料上下。用于PCR检测的病料，则可以冷冻保存。用于细菌分离的病料应在6h内送实验室分析，用于PCR检测的病料在-20°C保存条件下最好1周Z内送检。3疑似病毒性病料的采集、保存和运输3.1病料采集部位3.1.1疑似猪瘟病毒感染主要采集扁桃体、淋巴结、脾脏

6、、肾脏和血清。2.1.2疑似猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒感染主要采集肺、血清、扁桃体、脾淋巴结、粪便，新鲜流产胎儿的脾、肺、血清和胸水3.1.3疑似猪流行性乙型脑炎病毒感染主要采集患病动物的脑、脑脊髓液、和死产胎儿的脑组织，血液、分泌物、脾、肿胀的睾丸（含毒量最咼）O3.1.4疑似猪细小病毒病感染采集流产或产死胎儿的新鲜脏器（脑、肾、肝、肺、睾丸、胎盘及肠系膜淋巴结等），以肠系膜淋巴结和肝脏最佳。3.1.5疑似猪伪狂犬病病毒感染主要采集脑、血清和扁桃体；另外，鼻咽分泌物也可用于病毒分离。3.1.6疑似猪圆环病毒2型感染主要采集肺

7、脏、淋巴结、肾脏和血清。活体采集最好采集扁桃体。3.1.7疑似猪口蹄疫病毒感染采集未破裂或刚破裂的水疱皮（液），对新发病死亡的动物可采取脊髄、扁桃体、淋巴结组织等。3.1.8疑似猪传染性胃肠炎主要采集十二指肠、空肠及回肠的黏膜，鼻腔、气管、肺的黏膜及扁桃体、粪便3.1.9疑似猪流行性腹泻主要采集粪便。3.1.10疑似猪轮状病毒感染主要采集粪便和肠内容物。3.1.11疑似流感病毒感染主要采集鼻腔黏液，也可采集肺脏和淋巴结。3.2具体采集方法对于能采集血清送检的病毒样本，可以前腔静脉或耳静脉采血（2毫升）送检；鼻腔黏液或粪便能检测

8、出的病毒则选择采集鼻腔黏液、粪便；对丁-有条件采集组织送检的则采取组织，采集病料组织的个体最好是发病的活体，整个采集过程尽量保证清洁，采集3-4cm3的病变组织，采集病料前先放血，从大腿内侧将皮肤、肌肉切开，直接将股动脉割断，放血至病猪休克死亡。3、扁桃体采集：可使用专业扁桃