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时间:2018-09-15
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1、病料的采集、保存与送检病理组织学检验材料的采集、固定细菌学检验材料的采集、保存病毒学检验材料的采集、保存毒物检验材料的采集、保存各种病理检查病料的送检一、概述(一)“病料”的涵义狭义:用于疾病诊断的材料广义:动物科学、科研、实验等多方面的材料。(动物生理、组织胚胎、药物试验、疾病模型的建立与复制、动物营养研究等)(二)正确采集、保存与送检病料的重要性疾病诊断结果与正确正确采集、保存与送检病料的关系科研结果与实验材料的正确采集、保存与送检的关系(三)病料的采集、保存与送检三者之间的关系正确采集病料是保证正确结果的关键正确保存送检病料是获得正确结果的保证三者均影响结
2、果的正确性(四)动物尸检技术在科研教学中的重要作用二、用于组织学检查病料的采集、保存与送检(一)病料的采集(取材)取材应目的明确有病变的组织必取有目标时重点取目标不明确,全面取取材时间应尽早:夏季不超过6小时,冬季不超过24小时,立即固定取材部位典型(含病变、过渡、正常组织)。组织结构完整(肾:被膜、皮质、髓质;肠管:外膜、肌层、粘膜)取材大小及数量:以1.5-2cm×1.5-2cm×0.3-0.5cm为好特殊组织取材:柔软易变形组织:肠系膜、神经干扩张变薄的囊腔器官:肠、膀胱、胆囊等体积微小的器官:大、小鼠的垂体、视神经含气易漂浮的组织:肺脏液体状病料:血液、
3、脓汁、渗出液(浓缩、涂片)防人为病变,取材用具要快,动作要轻,忌挤压(二)病料的保存(固定)固定的作用固定液的选择固定的时间固定容器及固定液的量固定温度常用固定液的配制举例10%福尔马林溶液:主要用于脂肪、神经、及糖原的保存酒精:80-90%为好,具有硬化、固定、脱水作用A.F液:无水酒精或95%酒精90ml,40%甲醛10ml。具有固定兼脱水作用,直接进入95%酒精Bouin液:苦味酸饱和水溶液75ml,40%甲醛水溶液25ml,冰醋酸5mlCaroy’s液:无水酒精60ml,冰醋酸10ml,氯仿30ml。适于糖原及尼氏小体固定,显示DNA和RNA效果很好。(
4、三)病料的送检及时:新鲜病料:4小时内能运到已固定病料:密封,防震措施附送检单及说明专人送检三、用于微生物检查的材料的采集、保存与送检(细菌学、病毒学)微生物检查材料的特点:无菌、无污染(一)病料的采集(取材)实质脏器的取材:烧烙法灭菌液体病料的取材(血液、胆汁、渗出物、脓汁等,烧烙包膜表面,灭菌注射器吸取,涂片!!全血:抗凝血(无菌采取静脉血)抗凝剂:4%枸櫞酸钠0.1ml抗凝1ml血20%枸櫞酸钠或是10%EDTA-Na,2-3滴抗凝5ml血液肝素:1-2mg抗凝1ml血液,多用于病毒检查血清:自然凝固析出或是离心处理(快速)肠内容物:烧烙表面,吸出内容物皮
5、肤、毛及皮屑:刀刮至真皮层,收集皮屑脑、脊髓:常作病毒分离培养检查(二)保存细菌学检查材料的保存液体材料:容器口密封组织块:A:饱和盐水B:30%甘油缓冲液各种涂片、触片、抹片等,自然干燥较长时间保存,根据不同要求,不同温度冷藏。病毒学检查材料的保存实质脏器(组织块)甘油缓冲液鸡蛋生理盐水液体材料同细菌的保存方法冷藏:病毒分离材料4℃只能保存数小时,故长期保存应在-70℃保存四、用于毒物分析材料的收集、保存与送检中毒的诊断临床症状+尸检--初步诊断;须确诊时,需进行毒物化验,分析毒物分析结果与材料采集关系密切样品量少(微量):不易检出易挥发:结果不准或是无毒容器
6、不净:污染,误判(一)样品采集总原则:采含毒量多而不易检出的材料常采集:呕吐、排泄物、胃肠内容物、血液、粪尿、肾、肝、脑、剩余食料,饮水样品种类及量(见附表)量要足够,多处取材,最好分开,也可将胃肠内容物和心、肝、脑等实质脏器混装附表:常见毒物中毒的样品采取表毒物剩余饲料呕吐物、胃及胃内容物肠内容物粪便尿液血液肝肾脑氰化物+++++++磷及磷化锌++++++砷、铅++++++++++有机磷农药+++++++有机氯农药++++++++汞及有机汞+++++++++++生物碱+++++亚硝酸盐+++++++毒鼠药+++++++样品采集的量和包装法样品采样量包装法附注剩
7、余饲料500-1000g塑料袋胃内容物250-500g广口瓶或塑料袋密封肠内容物250g左右广口瓶或塑料袋密封粪便250g左右广口瓶或塑料袋密封实质脏器100-250g/脏器广口瓶或塑料袋密封血液50-100ml玻璃瓶或大试管密封尿液200-500ml玻璃瓶密封(二)保存保存容器要洁净,无化学物污染,忌用金属制品,以玻璃、陶瓷器皿为好干物质可用干净的塑料袋、纸袋(牛皮纸)材料中不可用防腐剂,非用不可时可用酒精,同时送对照所存材料要标明名称,取材时间,死亡时间,送检要求等(三)送检封装(严密)尽快:防腐败变质(组织),挥发破坏,最好在冷藏条件下提供中毒情况饲养管理
8、及使疫情况:饲料、饮水、
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