生物制药论文1

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1、生物制药论文1北华人学化学与生物学院班级：生物10级2班姓名：齐爽学号:201014010217指导教师：王博2纶物工稈在纶物制药领域的应用和发展技术操作内容摘要：木文简述了近年来基因工程在空物制药技术的发展和应用。其中主要从基因操作中大分了的分离、PCR技术、基因芯片、外源基因的表达这4个方iflj叙述基因工程相关技术的应用和发展，以及基因工程药物的产业化现状与发展趋势。关键诃：生物技术基因工程基因操作技术生物制药1棊本概念1.1生物技术广义的生物技术是指人类対生物资源（包括动物、植物、微生物）的利用、改造的和关技术。其发展经历了三个不同的阶段——以酿

2、造为代表的传统生物技术以微生物发酵为代表的近代生物技术以基因工程、细胞工程、酶工程和蛋白质工程为代表的现代生物技术。现代生物技术可以理解为是直接操纵有机体细胞和基因的一种全新技术是二十世纪70年代开始异军突起的高技术领域，在医疗、制药、农业、轻工食品及环保业发展迅速。60以上的生物技术成果集中应用于页药工业。1.2现代生物技术两大核心工程1.2.1工程概念：基因工程是分子遗传学和工程技术结合的产物。是现代生物技术的核心它能按人类需要把遗传物质DZA分了从生物体中分离出来进行剪切、组介、拼装合成新的DNA分子。再将新的DNA分子栢入某种生物细胞中使遗传信息

3、在新的宿主细胞或个体中得到表达以达到定向改造或重建新物种的冃的.1.2.2细胞工程概念：利川细胞融合技术把含有不同遗传物质的细胞合成杂种细胞。并使之分裂生长成为杂种生物。它包括体细胞融合、核移植、细胞器摄取和染色体片段的重组等。1.3现代生物制药主耍指基因重组的蛋白质分子类药物的制造过程即利用基因工程、抗体工程或细胞工程技术生产的源自生物体内的天然物质用于体内诊断、治疗或预防药物的生产过程(也可称基因工程制药)。2基因操作技术:基因大分子的分离主耍指质粒(plasmidDNA)和基因组DNA的分离。质粒分离的常用方法有碱变性抽提法、煮沸法、去污剂裂解法、

4、质粒DNA释放法、酸酚法等。质粒在基因工程中最常用来做成各种克隆载体(cloningvector)或表达载体(expressionvector)o质粒载体还可用于RNA干扰(RAinter-ferencc)的研究[1](由于这一技术的研究和应用，美国科学家AndrewZ.Fire博士和CraigC.Mello博士获得了2006年度的诺贝尔生理学或医学奖)。基因组DNA的分离通常采用酚-氯仿法、2基因文库(genelibrary).Southern杂交以及PCR扩增技术等。其中基因文库是指含有某种生物基因组不同基因片段的一■群DNA重组体克隆，包括cDN

5、A文库(com-plementaryDNA1ibrary,cDNAlibrary)和基因组DNA文库(genomiclibrary)。最近又有研究者利用名为chum-RNA的小分子RNA建立非PCR扩增的单细胞cDNA文库⑵。1.1聚合酶链式反应聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)是一种在体外模拟天然DNA复制过程的核酸扩增技术。该法±Mullis等人于1985年发明，并于1993年获得了诺贝尔化学奖。PCR技术的基木原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核甘酸引物。PCR由变性一退火一延伸

6、三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DXA经加热至93°C左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55°C左右，弓I物与模板DM单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：D7A模板一引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一•条新的与模板DNA链互补的半保留复制链，重复循环变性一退火一延伸三过程就对获得更多的“半保留复制链”，而且

7、这种新链乂可成为下次循坏的模板。每完成一个循坏需2〜4分钟，2〜3小时就能将待扩FI的基因扩增放大几百万倍。PCR技术可分为定性PCR和定量PCRc2.2定性PCR技术定性PCR技术包括：反转录PCR(reversetranscriptionPCR,RT-PCR),是从非常少量的mRNA样品构建人容量cDNA文库的方法,还发展出实时RT-PCR用于定量实验[3];多重PCR(multiplexPCR),是指在同一PCR反应体系中加入多对不同的引物，以扩增同一模板的不同区域;反向PCR(inversePCR),该法可以对一个已知DNA片段两侧的未知序列进行

8、扩增和研究；锚定PCR(an-choredPCR),现称为cDNA末端快速扩增技