病原微生物应急检测

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1、病原微生物应急检测柯昌文广东省疾病预防控制中心一、病原微生物引起的传染病我国传染病法规定的法定报告传染病分类：甲、乙、丙3类，从数量上共有39种，主要由病毒、细菌和寄生虫引起。（一）甲类传染病主要鼠疫和霍乱。（二）乙类传染病（1）病毒引起的：传染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感、新型甲型H1N1流感、麻疹、病毒性肝炎、艾滋病、脊髓灰质炎、流行性出血热、狂犬病、流行性乙型脑炎。（2）细菌引起的：伤寒和副伤寒、淋病、梅毒、百日咳、白喉、流行性脑脊髓膜炎、猩红热、钩端螺旋体病、布鲁氏菌病、炭疽、肺结核、新生儿破伤风。（3）寄

2、生虫和细菌：疟疾、血吸虫病、细菌性和阿米巴性痢疾。（三）丙类传染病（1）病毒引起的主要有：流行性感冒、流行性腮腺炎、急性出血性结膜炎、手足口病、风疹及除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病。（2）细菌和寄生虫引起的：麻风病、流行性和地方性斑疹伤寒、黑热病、丝虫病、包虫病。（四）病原微生物引起的综合征1、急性腹泻综合征（1）细菌性腹泻：霍乱弧菌、志贺氏菌、大肠杆菌（肠毒素性和肠出血性）、沙门菌、空肠弯曲菌、小肠结肠耶尔森菌、艰难梭菌等。（2）病毒性腹泻：轮状病毒、诺如病毒、腺病毒、埃博拉和其他出血热病毒等。（3）寄生

3、虫性腹泻：痢疾阿米巴、隐孢子虫、贾迪鞭毛虫等。2、急性出血热综合征登革热病毒、汉坦病毒、克里米亚-刚果热病毒、埃博拉病毒、拉萨热病毒、马尔堡出血热病毒、裂谷热病毒、南美沙粒病毒、蜱传播的黄病毒、黄热病病毒等。3、急性黄疸综合征A，B，E型肝炎病毒、钩端螺旋体、黄热病病毒等、4、急性神经性综合征(1)细菌性脑膜炎：脑膜炎奈瑟氏菌、钩体、肺炎链球菌、嗜血流感杆菌、大肠杆菌、李斯特菌等。(2)病毒性脑炎：乙型脑炎病毒、脊髓灰质炎、狂犬病毒、肠道病毒、蜱传播的脑炎病毒等(3)寄生虫性脑炎：锥形虫、疟原虫等。5、急性呼吸综合征（1

4、）细菌性：炭疽杆菌、鼠疫杆菌、百日咳杆菌、白喉杆菌、A群链球菌、TB、军团菌、支原体、衣原体等。（2）病毒性：冠状病毒、流感和禽流感病毒、肺综合征汉坦病毒和腺病毒等。6、急性皮肤综合征水痘病毒、麻疹病毒、风疹病毒、肠道病毒71、柯萨奇病毒A组16型、斑疹伤寒立克次氏体、炭疽杆菌、猴豆病毒、细小病毒B19、基孔肯雅热病毒等。7、急性眼综合征腺病毒、肠道病毒、沙眼衣原体8、急性全身性综合征炭疽杆菌、鼠疫杆菌、布氏菌、伤寒沙门菌、钩体、HIV、登革病毒、汉坦病毒、疟原虫莱姆病螺旋体。二、应急检测的目的和意义应急检测的目的和意义

5、是1、识别暴发、确定病因2、确定传染来源3、确定传播链和流行范围4、发现新的病原微生物5、提供仲裁依据三、病原微生物的特点及其应急检测病毒不是完整的生物体，结构简单，需要再电子显微镜下才能看清楚。电镜是研究病毒和细胞相互作用的重要工具，但是在诊断实验室的使用却非常有限。要想直接用电镜观察检测病毒，样品必须含有高滴度的病毒颗粒（106到107个/ml）但也可通过样品浓缩和使用标记抗体提高敏感性。电镜主要用于不可培养的病毒检测，特别是病毒性胃肠炎病原体检测。细菌的诊断相对容易，培养也较方便。（一）病原微生物及其抗原和核酸的检

6、测方法和初步结果报告时限1、分离培养（细菌：48～72小时，病毒14～28天）2、免疫荧光法（4～8小时）3、固相免疫分析胶体金法（30～60分钟）4、酶联免疫分析（ELISA)（4～8小时）5、核酸扩增聚合酶链式反应（PCR）（4～8小时）6、实时荧光PCR（3～4小时）7、核酸序列分析（16～24小时）8、形态学诊断（24～72小时）二）血清学抗体检测方法和初步结果报告时限1、ELISA检测感染早期IgM抗体（4～8小时）2、ELISA检测感染急性期和恢复期IgG抗体（4～8小时）3、病毒抗体中和试验测定急性期和恢复

7、期中和抗体（7天）4、血球凝集抑制检测病毒抗体（4～8小时）5、试管凝集试验检测细菌抗体（4～8小时）6、间接血球凝集抑制试验检测病毒抗体（4～8小时）7、补体结合试验（24～48小时）（三）选择检验方法需考虑的因素1、疑似病原微生物感染的病理学知识2、病人感染的病程和采样时间3、各种方法对疑似病原微生物感染的适用性4、可用于检测标本类别（四）实验室结果的意义和解释1、病原微生物感染的实验室诊断需要多方面的信息，包括：对可疑病原体的致病机理的理解，对感染阶段的认识，被感染者的年龄和免疫状况等。2、病原微生物分离培养的成功

8、与多个因素有关，包括：选择适当的标本，仔细收集标本以最大限度收集到致病因子，标本的运输必须尽量保持病原体活性，减少污染菌的增殖等。3、如果从疑似病人的标本中分离到目标细菌和病毒，可以确诊。4、如果在疑似病人的标本中检测到目标细菌和病毒核酸，可以确诊。5、如果目标病原微生物感染的中和抗体或IgG抗体或其他方法测定的抗体