探究不同活性炭浓度对薄荷植物组织培养的影响

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1、探究不同活性炭浓度对薄荷植物组织培养的影响学校：广州大学学院：生命科学学院专业：生物工程班级：生工131班姓名：学号：同组人：探究不同活性炭浓度对薄荷植物组织培养的影响摘要：本实验以植物薄荷为实验材料，釆川植物纽织培养的方法，通过控制培养基屮活性炭的浓度，对薄荷的茎尖进行体外培养。成功诱导茎尖长出芽和根，从而完成了植株再生的1=1的，得出适合诱导芽和根的培养基中活性炭的最适浓度为0.02%~0.5%。关键词：植物薄荷、活性炭、茎尖前吕薄荷属｛Mentha.L)植物是一种用途广泛的小药材，也是世界上主要的香料植物Z—。薄荷属

2、植物内种间杂交情况十分普遍，冇性繁殖极易造成品种混杂，难以区分。一般都采用无性繁殖，但长期采用无性繁殖，导致病毒病十分普遍，引起品种的退化和产量、质量的下降。通过组织培养可以对植株进行脱毒复壮，并口可以保持植物优良性状遗传的稳定性，防止品种过快退化O同时，研究发现在野薄荷的茎段组织培养屮发现活性炭能明显地促进芽和根的牛长。活性炭对外植体褐变有一定的抑制作用，除了能吸附培养基屮的酚类物质，减轻对培养物的毒害外，还在一定程度上降低光照强度，从两方面减轻褐变。因此，本次实验采用薄荷属植物薄荷(M.hapolcalyx.Briq.

3、)作为实验材料，进行植物薄荷的组织培养，并通过在诱导发芽和诱导牛根的培养基中分别设培养基中活性炭的浓度为：0,0.02%,0.5%,1%进行实验，比较何种浓度的活性炭能明显地促进芽和根的生长,并且减轻褐变作用。1.研究材料与方法1.1研究材料本实验采用的是薄荷属｛Mentha.L)植物薄荷(M.hapolcalyx.Briq.)作为实验材料。消毒后切取5mm左右的茎尖或侧芽作为外植体。1.2实验方法1.2.1培养基配方以MS培养基为基本培养基，分别加入不同浓度的活性炭进行对比实验，培养基配方如下：表1培养基配方Eiij不含

4、活性炭5g/L琼脂+40g/L蔗糖+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+MS含0.02%活性炭5g/L琼脂+40g/L蔗®+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+MS+0.02%活性炭含0.5%活性炭5g/L琼脂+40g/L蘆糖+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+MS+0.5%活性炭含1%活性炭5g/L琼脂+40g/L蔗糖+2.5mg/L6-BA+0.2mg/LNAA+MS+1%活性炭122外植体的消毒方法:自来水冲洗叶片10-20min；修剪叶片，得到0.2〜0.5cm茎尖；75%乙醇迅速漂

5、洗30s；0.1%氯化汞处理lOmin或0.2%氯化汞处理8min；无菌水冲洗2〜3次；収出茎尖进行接种培养。1.2.3接种方式及培养条件：接种时将外植体角度为45。斜插入培养基中；接种后的培养基放置于培养室中培养，培养温度25°C,光照时间12h/do2•结果记录及分析2.1实验观察记录2.1.1不含活性炭的薄荷植物组织培养将薄荷的外植体接种于不含活性炭的培养基①〜⑦，每隔7犬进行观察记录，结果如F：表2不含活性炭的薄荷植物组织培养观察记录表接种天数/d接种数/瓶芽（根）发生数目/瓶平均芽长/cm芽（根）牛长状态污染率9

6、711刚刚开始发芽57.1%15723①芽长5cm（有污染）；②芽长1cm57.1%22724①芽长6cm（有污染）；②芽长2cm57.1%29726.5②〜③芽长6-7cm57.1%44727②芽长7cm；③芽长7cm（有污染）71.4%2.1.2含0.02%的薄荷卅i物组织培养将薄荷的外植体接种于含0.02%活性炭的培养基①~⑦，每隔7天进行观察记录，结果如下：表3含0.02%活性炭的薄荷植物组织培养观察记录表接种天数/d接种数/瓶芽（根）发生数目/瓶平均芽长/cm芽（根）牛长状态污染率（%）9753①②芽长5cm；③

7、芽长3cm；④⑤芽长1cm28.6%15753.2①芽长6cm（有污染）；②芽长5cm；③芽长3cm；④⑤芽长1cm42.9%22753.8①芽长6cm（有污染）；②③芽长5cm；④⑤芽长2cm42.9%29756.4②③芽长8cm,长根;④芽长7cm,侧芽较长;⑤芽长3cm,较多侧芽42.9%447512.6③④芽长15cm,长根和较长侧芽；⑤芽长8cm,较多侧芽57.1%2.1.3含0.5%的薄荷植物组织培养将薄荷的外植体接种于含0.5%活性炭的培养基①~⑦，每隔7天进行观察记录，结果如T：农4含0.5%活性炭的薄荷植

8、物组织培养观察记录表接种天数/d接种数/瓶芽（根）发生数冃/瓶平均芽长/cm芽（根）生长状态污染率（%）9743①②芽长4cm；③④芽长2cm42.9%15734②③④芽长4cm57.1%22734.3②③芽长4cm；④芽长5cm57.1%29736.3②③芽长5cm；④芽长9cm57.1%44738.