微生物学重点与难点剖析第八章微生物的生长繁殖及其控制

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1、第八章微生物的生长繁殖及其控制重点与难点剖析一、微生物生长繁殖的概念微牛物的牛长是指细胞物质有规律地、不可逆增加，导致个体体积扩大的生物学过程。当细胞个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加即繁殖。在高等生物里这两个过程可以明显分开，但对低等特别是单细胞的微生物，由于细胞小，这两个过程紧密联系、很难划分，因此，微生物的生长繁殖，一般指群体生长，这一点与研究动物、植物有所不同。1、细菌一般没有有性繁殖，多采用二分裂方式。2、真菌除了进行无性繁殖，产牛大量砲子如分生砲子、节胞子、厚垣砲子、胞囊砲子等外，还能进行有性繁殖，产生有性砲子如卵砲子、接合砲子、砲囊

2、砲子等。二、微生物生长的测定微牛物牛长：单位时间里微牛:物数量或生物量（Biomass）的变化个体计数微牛物牛长的测定:J群体重量测定L群体生理指标测定（一）以数量变化对微生物生长情况进行测定通常用來测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长或样品中所含微生物个体的数量（细菌、他了、酵母菌）。1、培养平板计数法样品充分混匀后，取一定量的稀释液涂布或倾注在平板上，进行培养，统计平板上长出的菌落数。注意:1）同一稀释度三个以上重复，収平均值；2）每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数；一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成单位（colonyformingunits,CFU）

3、來表示，而不是直接表示为细胞数。2、膜过滤培养法当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮川水等样品通过膜过滤器，然后将膜转到相应的培养基上进行培养，对形成的菌落进行统计。3、Themostprobablenumbermethod（液体稀释法）1）未知样品进行十倍稀释；2）収三个连续的稀释度平行接种多支试管并培养；3）长菌的为阳性，未长菌的为阴性；4）查表推算出样品中的微生物数目；4、显微镜直接计数法采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下対微牛•物数量进行直接计数，计算一定容积里样品中微生物的总数量。缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数；需要相对高的细菌浓度；个体

4、小的细菌在显微镜下难以观察；（二）以生物量为指标测定微生物的生长1、比浊法在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度（opticaldensity,即O.D.）表示菌量。多应用于单细胞微牛物的培养。2、重量法以干重、湿重直接衡量微牛•物群体的牛物量。或通过样品中蛋白质、核酸含量的测定间接推算微生物群体的生物量；该方法适合于测定多细胞及丝状真菌生长情况的冇效方法。3、生理指标法微牛物的牛:理指标，如呼吸强度，耗氧量、酶活性、牛:物热等与其群体的规模成正相关。样品中微牛物数量多或牛长旺盛，这些指标愈明显，因此可以借助特定的仪器如瓦勃氏呼吸仪、微量量热计等设备來测定相应的指标。三、生长曲线

5、(GrowthCurve):细菌接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量，以培养时间为横座标，以菌数为纵座标作图，得到的一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。一条典型的生长曲线可以分为：迟缓期，対数期，稳定期和衰亡期四个生长时期。1、延缓期(LagPhase):将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零，该时期乂称延迟期、适应期。迟缓期出现的原因：微牛物接种到一个新环境，暂时缺乏分解和催化有关底物的陆，或是缺乏充足的中间代谢产物。为产牛诱导酶或合成中间代谢产物，就需要一段适应期。迟缓期的长短与菌种的遗传性、菌龄以及移种丽后所

6、处的环境条件等因素有关，短的只需要几分钟，长的需数小时。在生产实践中缩短迟缓期的常用手段(1)通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短；(2)利用对数生长期的细胞作为种了；(3)尽量使接种前后所使用的培养基组成不要和差太大；(4)适当扩大接种2、指数生长期(exponentialphase):以最大的速率牛长和分裂，细菌数量呈対数增加，细菌内各成分按比例有规律地增加，表现为平衡生长。对数牛长期的细菌个体形态、化学组成和牛:理特性等均较一•致，代谢旺盛、生长迅速、代时稳定，所以是研究微牛物基本代谢的良好材料。它也常在牛产上用作种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。几个重要的生

7、长参数：代时(Generationtime)通常以G表示，是指在细菌个体生长里，每个细菌分裂繁殖一代所需的时间为代时，在群体生长里细菌数量增加一倍所需的时间称为倍增时间(Doublingtime)。NlNoX2“logN〔=logNo+n•log2,and_logNt一logNq_logN,-logNolog20301U:比生长速率：单位时间内生长的速度。纳米细菌(nanobacteria),三天才分裂-次；3、稳定生长期(Stationaryphase)