微生物的生长繁殖及其控制笔记

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1、第六章微生物的生长繁殖及其控制微生物的分离和纯培养微生物的生长繁殖及其测定微生物生长繁殖的控制内容提要无菌技术微生物培养的常用器具及其灭菌干热灭菌湿热灭菌接种操作无菌条件下进行，工具：接种环或接种针纯培养的分离方法稀释倒（涂）平板法划线法选择培养基分离法单细胞（孢子）分离二元培养物主要用于病毒等寄生生物的培养培养物中含有两种微生物，并有意识地保持二者之间的特定关系的培养物称为二元培养物微生物的保藏技术干燥保藏法常用作中期保藏，时间为1～5年传代培养保藏常用作短期保藏，4℃保藏，时间为3～4月冷冻保藏法常用作长期保藏，时间为5～10年及以上微生

2、物的生长繁殖及其测定微生物生长的测定计数法、重量法、生理指标法微生物的生长繁殖细菌群体生长的规律细菌群体生长的数学模型细菌群体生长的主要参数同步培养连续培养生长曲线(growthcurve)描述细菌生长规律总菌数活菌数培养时间Ⅱ.对数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.迟缓期细菌数目（个/ml）对数ⅡⅢⅣⅠ细菌群体生长的规律延滞期出现原因把细菌接种到新鲜的培养基中培养时，并不立即进行分裂繁殖，细菌增殖数为０，这时需要合成多种酶，辅酶和某些中间代谢产物，要经过一个调整和适应过程。迟缓期特点生长速率常数等于零菌体粗大代谢活力强对不良条件抵抗能力降低ＲＮＡ含量增加

3、影响延滞期限长短因素接种龄接种量培养基成分缩短延滞期的意义和方法可以缩短生产周期，提高设备利用率。接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄加大接种量用与培养菌种相同组成分的培养基指数期(对数期)(exponentialphase)特点该期的细菌生产中多被用做种子和科学试验材料①活菌数和总菌数接近②酶系活跃，代谢旺盛。③生长速率最大，generationtime最短。④细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致NtN0t1t0培养时间Lg细胞数/mlt2-t13.322(lgNt-lgN0)生长速率常数R=t1-t03.322(lgNt-lgN0)代时G=指数

4、期生长的数学模型繁殖代数n=3.322(lgNt-lgN0)影响指数期的因素菌种营养成分营养物浓度培养温度稳定期(stationaryphase)出现原因营养的消耗有害代谢产物积累pH值Eh值等理化条件不适出现原因营养物比例失调稳定期特点活菌数保持相对稳定，总菌数达最高水平。细菌代谢物积累达到最高峰。芽孢杆菌这时开始形成芽孢。这是生产收获时期。衰亡期(declinephase/deathphase)特点细菌死亡数大于增殖数,活菌数明显减少,群体衰落细胞出现多形态,大小不等的畸形,变成衰退型细胞死亡,出现自溶现象。离心法硝酸纤维素滤膜法获得同步生长(

5、synchronousgrowth)的方法：机械方法环境条件控制技术（温度、培养基成分控制、其它）过滤法同步培养(synchronousculture)使培养基中细菌同时分裂，处于相同的生长阶段叫同步生长。连续培养(continuousculture)(openculture)将微生物置于一定容积的培养基中培养，最后一次收获，叫分批培养，将微生物放在恒定的容积的流动系统中培养称为连续培养。优点：缩短发酵周期；便于自动控制；产物质要量均一缺点：菌种易退化；易染杂菌……含N量法DNA/RNA法叶绿素法菌体内重要组成测定法微生物生长的测定称重量法测体积法

6、N×6.25=Pr测生长量(直接法)比浊法生理指标法测生长量(间接法)计繁殖数血球计数板法液体稀释法平板菌落计数法滤膜培养法各种型号的全自动血球计数仪微生物生长繁殖的控制环境因子对微生物生长的影响控制微生物的物理因素控制微生物的化学物质环境因子对微生物生长的影响营养物质氧水的活性温度pH嗜冷微生物（低温微生物）Ｅ系在低温下仍能起催化作用细胞膜含较多的不饱合脂肪酸在低温下仍具有通透性。上下班嗜冷机制：嗜热微生物的嗜热机制细胞内的Ｅ具强抗热性产生的多胺，热亚胺和高温精胺物质对蛋白质等组织结构具有保护作用。一一一一一口口口核酸也具有热稳定性的保护结构。细

7、胞膜含有较多的饱和脂肪酸和直链脂肪酸，使膜具有稳定性。上pH影响细胞膜透性与稳定性影响物质溶解度影响细胞表面电荷分布因此影响微生物生长、繁殖，发育。各类微生物能够生长的pH值较宽，但细胞内部pH值却接近中性。微生物的活动也能改变环境中的pH值氧气专性好氧菌（obligateorstrictaerobes）兼性厌氧菌（facultativeanaerobes）耐氧菌（aerotolerantanaerobes）厌氧菌（anaerobes）微好氧菌（microaerophilicbacteria）超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（Catalase）

8、厌氧菌（anaerobes）将环境中氧吸掉；抽真空；深层培养氧对其有毒能量来源于发酵无氧呼吸环式光合磷酸化或甲烷发酵O2.