高中生物《12基因工程的基本操作程序》导学案新人教版选修3

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1、专题一基因工程1.2基因工程的基本操作程序【学习目标】1.理解基因工程的原理2•简述基因工程基本步骤的几个步骤【学习重点】基因工程的基本操作步骤【基础回扣】仁转录:场所:模板:原料:酶:原则:结果:2、翻译:场所:模板:原料:酶:原则:结果:氨基酸有种,决定氨基酸的密码子共有种,一种tRNA只能携带—种氨基酸,一种氨基酸可以由种tRNA携带。mRNA,,U-U-A-G-A-U-A-C-U„这mRNA上有密码子个,与其相应的反密码子为O3、DNA复制:场所:模板:原料:酶:原则:结果:4、默写出中心法则:【预

2、习导学】一、目的基因的获取1、目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的o2、获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导入受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。r基因组文库:含有一种生物的基因②种类{cDNA文库:含有一种生物的基因(cDNA是反转录获得的双链DNA)③目的基因的获取根据基因的有关信息:基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。①PCR:是一项

3、在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。①条件:已知目的基因的序列。②过程:第一步:加热至90〜95°CDNA解链为;第二步:冷却到55〜60°C,与两条单链DNA结合;第三步:加热至70〜75°C,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行的合成。③方式:指数扩增=2(n为扩增循环的次数)(1)人工合成法:基因较小,核昔酸序列已知,可以人工合成。二、基因表达载体的构建K表达载体的组成:目的基因+++记基因等。2、启动子:位于基因的,它是RNA聚合酶和结合的部位,驱动基因转录产生mRNA3、终止子:位于基因的尾瑞Y止

4、审4、表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因和发挥作用。5、标记基因:受体细胞是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞来。6、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。构建方法:同种限制酶分别切割和,再用把两者连接。三、将目的基因导入受体细胞:(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法1、将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法①农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对植物没有感染力;Ti质粒的可转移

5、至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。进入②转化:目的基因插入Ti质粒的>农杆菌一导入植物细胞一目的基因整合到植物细胞染色体上f目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法基因枪法:是植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(3)花粉管通道法花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法。(我国的就是用止匕获得的)2、将目的基因导入动物细胞(1)方法:注射技术。(2)操作程序:目的基因表达载体〜取卵(受精卵)-显微注射-注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的内发育-新性状

6、动物。2+3、将目的基因导人微生物细胞:Ca处理法。首先将细胞用处理,成。接下来将重组表达载体DNA分子与受体细胞在中混合,促进感受态细胞完成转化过程。(三)受体细胞:仁植物细胞作受体细胞时,可以选用体细胞和细胞,当选择体细胞作受体细胞时,可以通过方式实现细胞的全能性。2、动物细胞作受体细胞时,只能选择细膩3、微生物作受体细胞,是利用原核生物的特点。四、①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用技术。②其次还要检测目的基因是否转录,方法是采用RNA分子杂交技术。③最后检测目的基因是

7、否翻译成,方法是采用杂交技术。④上述三步检测为分子水平的检测,还可以进行个体生物学水平的鉴定,如抗虫或抗病的鉴定等。基因工程的意义:能够打破生物种属的界限,即,在分子水平上改变生物的遗传特性。【经典例题】[例1]下列有关基因工程技术的正确叙述是()A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核昔酸序列C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达[例2]应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到探

8、测疾病的目的。基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B・用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成B球蛋白的DNAD•合成苯丙疑化酶DNA片段【基础试题训练】1>构建基因组DNA文库时,首先需分离细胞的()A、染色体DNAB、线粒体DNAC、总rnRNAD、tRNA2.在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苜酸对,其中腺瞟岭脱氧核苜酸是460个)放入DNA扩增仪中扩增4代,那么,在扩增仪中应放

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