高中生物：12基因工程基本操作程序学案人教版选修3

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1、1.2基因工程的基本操作程序【学习目标】1.理解基因工程的原理2.简述基因工程基本步骤的几个步骤【学习重点】基因工程的基木操作步骤【基础回扣】M:M:M:®:原结原结1、转录：场所：模板:酶：原则:2、翻译：场所：模板:酶：原则:氨基酸有种，决定氨基酸的密码子共有种，一种tRNA只能携带—种氨基酸,一种氨基酸可以由种tRM携带。mRNA……U-U-A-G-A-U-A-C-U……这mRNA上有密码子个，与其相应的反密码子为<3、DNA场所：模板：原料：复制酶：原则：结果：4、，默写出中心法则【预习导学】1、目的基因获

2、収（1）获取方法主要有两种：①获得原核细胞的目的基因可采取，获取真核细胞的目的基因一般是O②人工合成目的基因的常用方法有和。（2）PCR扩增目的基因含义：o①目的：获取大量的目的基因②原理：③过程：第一步：加热至90〜95°CDNA解链为；第二步：冷却到55〜60°C,与两条单链DNA结合；第三步：加热至70〜75°C,热稳定DNA聚合酶从引物起始进行的合成。特点：数日以形式扩增2、基因表达载体的构建（1）重组D"A分子的组成：除了目的基因外，还必须有、、o标记基因的的作用：鉴定中是否含有目的基因，从而将含有目的基

3、因的细胞出来。（2）构建方法：同种限制酶分别切割和,再用把两者连接。3、转化：是目的基因进入受体细胞内，在受体细胞内维持和的过程。（2）常用转化方法：①将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是，其次还有基因枪法和。②将目的基因导入动物细胞：受体细胞一般选择最常用的方法是。③将目的基因导入微生物细胞：Ca”处理法。首先将细胞用处理，成为o接下來将载体DNA分子与受体细胞在中混合，完成转化过程。4、①首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用技术。②其次还要检测目的基因是否转录出,方法是采用RN

4、A分子杂交技术。①最后检测目的基因是否翻译成,方法是采用杂交技术。②上述三步检测为分子水平的检测，还可以进行个体生物学水平的鉴定，如抗虫或抗病的鉴定等。基因工程的意义：能够打破生物种属的界限，即,在分子水平上改变生物的遗传特性。【疑难解析】1、核心操作基因表达载体构建的注意事项①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了H的基因、启动子、终止子三部分结构②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DM连接酶将冃的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键③启动

5、子、终止子对于目的基因表达必不可少④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。2、DNA复制与PCR技术的比较PCR技术DNA复制相同点原则碱基互不配对原料四种脱氧核昔酸条件模板、能量、酶不同点解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化场所体外复制细胞核内酶热稳定的DNA聚合酶细胞核内的DNA聚合酶结果大量的DNA片段整个DNA分子3、①目的基因检测，利用DNA分子杂交技术，提取受体细胞中的DNA,然后高温解成单链，再与同位素标记的DNA探针杂交看是否有杂交带；②inRM检测，利用RNA分子杂交技术

6、，冃的基因DNA—条链（作探针）与受体细胞屮提取的mRA朵交看是否有杂交带；③抗原一抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。例题巩固：1、获得目的基因的方法有（）A.构建基因文库从基因文库中获取B.人工合成C.PCR技术大量获得D.利用农杆菌转化法获得2、在基因工程屮，把选出的目的基因（共100个脱氧核苛酸对，其屮腺瞟吟脱氧核苛酸是46个）放入DNA扩增仪中扩增2代，那么，在扩增仪中应放入胞陀噪脫氧核昔酸的个数是（）A.54个B.162个C.378个D.756个3、

7、•哪项不是基因表达载体的组成部分（）A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因4、在基因诊断技术中，所用的探针DNA分子屮必须存在一定量的放射性同位素，后者的作用是（）A.为形成杂交的DNA分子提供能量C.作为探针DNA的示踪元素B.引起探针DNA产生不定向的基因突变D.增加探针DNA的分子量B.细菌质粒是基因工程常用的运载体“信号肽""内质网滞留序列“丁工基因信号"序列J①修怖后的CpT工基因ACpTH蛋白质5、下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A.基因工程经常以抗菌索抗性基因为目的基因C.通常用一种限制性

8、内切酶处理含目的基因的DNA,用另一种处理运载体DNAD.为育成抗除草剂的作物新品种，导入抗除草剂基因时只能以受精卵为受体【基础巩固】直豆对多种害虫具有抗虫能力，根本原因是虹豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因（CpTT基因）o科学家将其转移到水稻体内后，却发现效果不理想，主要原因是CpTl蛋白质的积累量不足。经过在体外对CpTI基因进行了修饰后，CPTI蛋白质在水