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1、CHD5基因甲基化与结直肠癌的发生发展及临床病理特征的关系【摘要】目的:探讨CHD5基因(染色质解旋酶DNA结合蛋白5)屮基化与结直肠癌(colorectalcancer,CRC)发生发展及临床病理特征的关系。方法：对40例CRC手术标本(癌组织、癌旁5cm组织、手术切缘正常组织)及40例结直肠腺瘤标本，采用甲基化特异性PCR技术(MSP)检测CHD5屮基化情况；RT-PCR方法(实时定量逆转录PCR)和Western-blot检测CHD5基因的表达水平；分析CHD5甲基化与结直肠癌临床病理特征关系。结果：CHD5屮基化阳性率在癌
2、组织(72.5%)显著高于正常(12.5%)、癌旁(22.5%)、腺瘤组织(47.5%)，(X2=29.463,X2=20.050,X2=5.208,P值均<0.05)，腺瘤组织显著高于正常及癌旁组织(X2=11.667，X2=5.495，P值均<0.05);CHD5屮基化与CRC分化程度、分期、淋巴转移及远处转移密切相关(X2=4.742,X2=4.409,X2=5.230,xM.905,P<0.05)。CHD5mRNA表达在正常(0.225±0.276)、癌旁(0.169±0.231)、腺瘤(0.147土0.159)、癌组织(
3、0.013±0.011)存在差别(PV0.05),呈下降趋势;癌组织CHD5蛋白表达在正常(0.438±0.205)>腺瘤(0.156±0.100)>癌组织(0.024±0.311)之间存在差别(PV0.05),呈下降趋势。癌组织CHD5mRNA与蛋白表达存在正相关，有统计学意义(「0.899,PV0.05)oCHD5蛋白失表达的癌组织中CHD5屮基化率为87.0%(20/23),CHD5蛋白表达的癌组织CHD5屮基化率为52.9%(9/17),甲基化率的差异有显著性(X2=5.6739P<0.05)o结论:CHD5屮基化与CRC
4、发生发展有关，其可能参与了大肠腺瘤■腺癌的演变过程；CHD5基因屮基化可能通过抑制转录、翻译，导致表达缺失，引起结直肠癌的发生发展；CHD5甲基化与CRC临床病理特征相关，肿瘤低分化、发生淋巴结转移、发生远处转移及恶性分期者，屮基化率高。【关键词】结直肠癌；屮基化；CHD5；屮基化特异性PCR；Real-TimePCR；Western-BlotStudyofrelationshipbetweenCHD5methylationandcolorectalcarcinogenesisandclinicalpathologicalfeat
5、ures【Abstract】Objective:ToinvestigatetherelationshipbetweenCHD5methylationandcolorectalcarcinogenesisandclinicalpathologicalfeatures.Methods:40colorectalcancertissuesspecimens(colorectalcancertissues,paracanceroustissueswhichcollectedatleastmorethan5cmfromthecancertis
6、sue,normalonesfromoperationmargin)and40adenomatissueswerecollected.WedetectedthemethylationofCHD5bymethylation-specificPCR(MSP),mRNAexpressionbyreversetranscriptionrealtimepolymerasechainreaction(RT・PCR)anditsproteinexpressionbywestern-blot.Results:CHD5methylationrate
7、incancertissues(72.5%)wassignificantlyhigherthannormaltissues(12.5%)?paracanceroustissues(22.5%)andadenomatissues(47.5%),(X2=29.463,X2=20.050,X2=5.208,P<0.05),meanwhilemethylationrateinadenomatissueswassignificantlyhigherthannormalandparacanceroustissues,(X2=11.6679X2
8、=5.495,P<0.05).CHD5methylationofCRCtissueshaspositiverelationwithdifferentiation,tumorstage,lymphnodemetastasisanddistantmet
