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《（梁有旺）一株油茶根际高效联合固氮菌的分离鉴定》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、“中国林学会经济林分会2011年学术年会”交流论文油茶根际联合固氮菌的16SrDNA全序列分析^梁有旺打彭方仁吴莺莺蔡苗陈隆升2,陈永忠彳（1.南京林业大学森林资源与环境学院，江苏南京210037;2.湖南省林业科学研究院，湖南长沙410004）摘要：利用16SrDNA序列系统发育学分析方法对从湖南省野生油茶根系分离筛选出的一株高效联合固氮菌株B7-7进行了系统分类研究。结果表明：该菌株与鞘脂菌属Sphin^obiumyanoikuyae的同源性和相似性均达到99%,结合固氮菌B7-7的形态特征和生理生化特性，初步
2、将其确定为鞘脂菌Sphingobiumsp.关键词：油茶；联合固氮菌；分离鉴定16SrDNACompleteGenomeSequenceAnalysisofoneco-efficientAssociativeNitrogenFixingBacteriafromRhizosphereofCamelliaLINAGYou-wang1,PENGFang-ren1基金项H：“十一五”科技支撑项H“华中丘陵区油茶高产良种应用集成示范”（2009BADB1B04）”作者简介：梁有旺（1979-）,男，I•専士生。研究方向为森林培育。
3、通讯作者：彭方仁（1963-）,男，教授，博士生导师，主要从事森林培育与经济林栽培的教学与研究工作E-mail:frpeng@njfii.edu.cn,VVUYing-ying1,CAIMiao1,CHENLong-sheng2,CHENYong-zhong2（1.CollegeofForestResourcesandEnvironment,NanjingForestryUniversity,Nanjing210037,China;2.HunanAcademyofForestry,Changsha410004,China
4、）Abstract:Ahighefficiencyassociativenitrogen-fixingbacteriaB7-7wasisolatedandscreenedfiomrhizosphereofCamellia・Theresultof16S1DNAsequencephylogeneticanalysisshowsthat:Phylogenybasedon16SrDNAsequenceofB7-7shares99%DNAhomologyandsimilaritywithSphingobiumyanoikuyae・
5、Basedontheanalysisresultsofmorphology,physiology,chemicalproperty,and16SrDNAsequencing,B7-7isidentifiedasSphingobiumsp.Keywords:CamelliaoleifermAssociativenitrogen-fixingbacteria；Isolationandidentification油茶〈CamelliaolelfeFa）是世界上重要的木本食用油料树种，其栽培措施受到了广泛的关注，其中关于油茶配方
6、施肥的研究也有很多⑴，而提高油茶产量的关键首先要靠氮肥［Z］。由于长期施用化学肥料容易对土壤结构及环境条件造成一定的破坏。为避免造成环境污染，施用生物菌肥是首选。本课题组从2010年开始对湖南省6种有代表性的油茶林分进行了联合固氮菌种类调查，共分离到29株具有固氮能力的菌株,其中固氮效能值高于10mg/g的有6株菌株叫其中固氮效能最高的N7・3菌株（固氮效能值为31.35mg/g）己经通过biolog系统鉴定为AzotobacteraceaeAzomonasspp^（'K而编号为B7-7菌株（其固氮效能第二高，固氮效能值
7、为22.16mg/g［5］）在BIOLOG系统中并找到匹配的ID,数据库中没有SIM值大于0.5的种属，用BIOLOG系统无法鉴定出这种菌的分类地位。目前，随着分子生物学技术的口益完善，16S2NA序列分析己经成为了细菌分类中很重要的一个手段，它能通过对目标菌种进行测序后，在Genbank网上对所测序列进行比对，寻找同源性高的菌种，从而建立系统进化树，能较全面地反映细菌之间的亲缘关系⑺°］。该技术在非豆科木本植物中仅见在红树林、文冠果根际细菌鉴定中有应用报道［10J11o为了进一步明确新发现的固氮菌株的系统发育地位，本研
8、究对B7・7菌株进行16SrDNA全序列测定，以鉴定该油茶固氮菌的种类，为油茶联合固氮菌的应用捉供理论依据。1材料与方法L1供试材料供试菌株为从湖南油茶林分根表分离纯化得到的固氮效能较高的菌株，编号为B7-7［5］o1.2菌株的分离与纯化121菌株分离选取固氮菌丰富的根系，用无菌水冲洗至流下水无浑浊，用灭菌剪刀将根段
