《部分酶的化学修饰》ppt课件

《《部分酶的化学修饰》ppt课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第四部分酶的化学修饰第一节前言第二节酶化学修饰的方法及修饰剂第三节酶分子侧链基团的化学修饰第四节有机大分子对酶的修饰第五节蛋白质类及其它第六节修饰酶的性质及特点第七节酶化学修饰的应用第一节前言一．酶的化学修饰原因1．稳定性不够，不能适应大量生产的需要。2．作用的最适条件不符。3．酶的主要动力学性质的不适应。4．临床应用的特殊要求。二．酶修饰的方向1．核酸水平2．蛋白质水平三．酶化学修饰的基本原理1．如何增强酶天然构象的稳定性与耐热性2．如何保护酶活性部位与抗抑制剂3．如何维持酶功能结构的完整性与抗蛋白水解酶4．如

2、何消除酶的抗原性及稳定酶的微环境第一节结束化学修饰原因酶修饰的方向基本原理稳定性不够，不能适应大量生产的需要。作用的最适条件不符。酶的主要动力学性质的不适应。临床应用的特殊要求。核酸水平蛋白质水平如何增强酶天然构象的稳定性与耐热性如何保护酶活性部位与抗抑制剂如何维持酶功能结构的完整性与抗蛋白水解酶如何消除酶的抗原性及稳定酶的微环境第一节结束点击返回第二节酶化学修饰的方法及修饰剂一．修饰剂的要求二．酶性质的了解三．反应条件的选择四．酶修饰方法一．修饰剂的要求1．修饰剂的分子量、修饰剂链的长度对蛋白质的吸附性。2．修

3、饰剂上反应基团的数目及位置。3．修饰剂上反应基团的活化方法与条件。二．酶性质的了解1．酶活性部位情况2．酶的稳定条件、酶反应最适条件3．酶分子侧链基团的化学性质及反应活泼性等。三．反应条件的选择1．反应体系中酶与修饰剂的分子比例。2．反应体系的溶剂性质，盐浓度和pH条件。3．反应温度及时间。四．酶修饰方法1．酶分子侧链基团的化学修饰2．有机大分子对酶的化学修饰3．蛋白质类及其他。第二节结束修饰剂的要求酶性质的了解反应条件的选择酶修饰方法第二节结束点击返回第三节酶分子侧链基团的化学修饰一．几种重要的修饰反应二．特定

4、氨基酸残基侧链基团的化学修饰三.研究新热点一．几种重要的修饰反应1．酰化及其相关反应2．烷基化反应3．氧化和还原反应4．芳香环取代反应二．特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰1．巯基的化学修饰巯基具有很强的亲核性，采用巯基化学修饰剂与酶蛋白侧链上的巯基结合，使巯基发生改变，从而改变酶的空间构象、特性和功能。常用：烷基化剂、酰化基、马来酰亚胺2．氨基的化学修饰3．羧基的化学修饰4．咪唑基的化学修饰5．胍基的化学修饰三.研究热点-核酸类酶的修饰RNA酶的侧连基团：指组成RNA的核苷酸残基上的功能团。主要是核糖2’-位置上

5、的羟基和嘌呤、嘧啶碱基上的氨基和羟基。第三节结束重要的修饰反应特定氨基酸残基侧链基团的化学修饰酰化及其相关反应烷基化反应氧化和还原反应芳香环取代反应巯基的化学修饰氨基的化学修饰羧基的化学修饰咪唑基的化学修饰胍基的化学修饰二硫基的化学修饰第三节结束点击返回第四节有机大分子对酶的修饰一.概念利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生某些精细的改变，从而改变酶的特性与功能的方法称为大分子结合修饰法，简称为大分子结合法。二．常使用的水溶性大分子修饰剂糖及糖的衍生物生物活性大分子具有生物活性的大分子物质第四节结束概念常用

6、的水溶性大分子修饰剂举例糖及糖衍生物：如聚乙二醇生物活性大分子：如肝素大分子多聚物：如乙烯酮精氨酸酶经聚乙二醇（PEG）结合修饰聚乙二醇对色氨酸酶进行修饰聚乙二醇结合修饰后的L-天门冬酰胺酶第四节结束点击返回第五节蛋白质类及其它一．蛋白质类修饰二．金属离子置换修饰一．蛋白质类修饰血浆蛋白质，其中人血清白蛋白应用较多常用方法1．戊二醛法：戊二醛双功能基团2．碳二亚胺法：碳二亚胺作为交联剂3．活性酯法：☆活性酯法-a白蛋白琥珀酰化活性酯法-b活性酯形成反应活性酯法-c修饰反应二．金属离子置换修饰1．概念通过改变酶分子

7、中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法称为金属离子置换修饰。2．常用离子常用二价金属离子。金属离子置换修饰法只适用于本来在结构中含有金属离子的酶举例将锌型蛋白酶的Zn2+除去，然后用Ca2+置换成钙型蛋白酶，则酶活力可提高20-30%。若将钙型蛋白酶制成结晶，则其酶活力比锌型蛋白酶结晶的酶活力提高2-3倍。第六节修饰酶的性质及特点一．热稳定性二．抗原性三．体内半衰期四．最适pH五．酶学性质的改变六．对组织的分布能力变化一．热稳定性热稳定性增加1．修饰剂与酶多点交联，固定了酶的分子构象，增强了酶的热稳定性

8、。2．增强酶天然构象的稳定性减少了酶热失活。二．抗原性部分可消除。PEG、人血清白蛋白在消除酶抗原性上效果明显。三．体内半衰期体内半衰期延长四．最适pH有些酶经过化学修饰后，最适pH发生变化五．酶学性质的改变绝大多数酶经过修饰后，最大反应速度没有改变，但有些酶在修饰后，米氏常数会增大。六．对组织的分布能力变化对组织的分布能力有所改变，能在血液中被靶器官选择性地吸收。第六节