动物细胞悬浮培养技术在兽用疫苗生产领域中的应用_李群

《动物细胞悬浮培养技术在兽用疫苗生产领域中的应用_李群》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·２３６·经验交流中国畜牧兽医２０１３年第４０卷第６期动物细胞悬浮培养技术在兽用疫苗生产领域中的应用李群，钱钟，范娟，李玉和（扬州优邦生物制药有限公司，江苏扬州２２５００８）摘要：近年来，动物细胞悬浮培养技术备受关注，该技术已广泛应用于各类生物制品及兽用疫苗的研究和生产过程中。细胞悬浮培养生产兽用疫苗既能降低成本，也能提高产品质量。以生物反应器技术为基础的细胞悬浮培养技术平台正逐步被建立起来且日趋成熟，成为推动兽用疫苗生产快速发展的主要动力。文章介绍了细胞悬浮培养技术，并就该技术在兽用疫苗生产中的应用进行了论述。关键词：动物细胞；悬浮培养；兽用疫苗

2、；生物反应器中图分类号：Ｑ８１３．１＋１文献标识码：Ａ文章编号：１６７１－７２３６（２０１３）０６－０２３６－０５动物细胞培养开始于２０世纪初，Ｈａｒｒｉｓｏｎ要。文章对大规模细胞培养技术进行介绍，并对该（１９０７）以青蛙凝固的淋巴液为培养基，在无菌条件技术在兽用疫苗生产中的应用进行了概述。下成功地在试管中培养了蛙胚神经组织数周之久，１优化细胞悬浮培养的关键技术且观察到细胞的生长过程。Ｃａｒｒｅｌ（１９１２）将无菌操疫苗生产工艺研发的２个主要目的是提高产率作技术引入动物细胞培养，并发现动物体液中一些和保证产物质量的可靠性。前者直接关系到商业化生长因

3、子对动物细胞生长有强烈的促进作用，这也生产的可行性，后者则关系到疫苗的安全和有效性。为无血清培养基的研究奠定了基础。ｖａｎＷｅｚｅｌ对应的悬浮培养技术主要包括悬浮细胞的选择、最（１９６７）和Ｋｎａｚｅｋ等（１９７２）分别创立的微载体悬浮适生长培养基的选择、生物反应器和生产工艺的选培养系统和空纤维细胞培养技术，是细胞大规模体择等方面。外培养的先河。随着细胞培养技术的不断发展，这１．１动物细胞系的选择及悬浮驯化在疫苗生产种细胞悬浮培养技术已能用于病毒大规模的培养，过程中，优先考虑的就是疫苗的安全性、有效性及成并在国外疫苗生产中普遍被应用。悬浮培养技术是

4、本的控制。要想优化好以上几点一定要在细胞系的在生物反应器中，人工条件下高效率大规模培养动选择及悬浮驯化２个方面下功夫。同种细胞与准备物细胞用于生物制品生产的技术。根据细胞贴壁能扩增的病毒之间具有相互作用，在使用某种细胞系力的不同，又分为全悬浮培养和贴壁微载体悬浮培进行大规模疫苗生产前首先需与准备增殖的病毒进养２种方式。由于该生产工艺具有生产效率比高、行相互适应选择。细胞的生长特性还决定能否进行质量与生物安全易控制等优点（张韧等，２０１１），细胞扩大培养及使用何种工艺进行扩大培养。一种细胞悬浮培养被广泛应用于蛋白质相关药物研发、疫苗在不同状态下进行培

5、养时对病毒的敏感性会截然不生产、干细胞移植及人造组织器官培养等各个领域。同，即便是同种细胞的不同克隆株之间对同一种病用于体外培养的细胞大部分为动物源，所以大规模毒也会表现出不同的敏感性。除此之外，悬浮细胞细胞培养技术在兽用疫苗生产中的应用显得更为重还需具有繁殖速率高、活力较强、生物稳定性高等特点。细胞的悬浮首先需要驯化，尤其对于贴壁细胞，修回日期：２０１３－０４－０１作者简介：李群（１９８５－），女，山东人，硕士，从事生物医因微载体悬浮培养会导致贴壁细胞的生长状态发生药研究。较大的改变。细胞驯化过程中其稳定性最为重要，櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅

6、櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅櫅Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ，ａｎＥＬＩＳＡｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ（ＣＡＰ）ｒｅｓｉｄｕｅｉｎａｎｉｍａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｗａｓｕｓｅｄ．ＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｉｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＥＬＩＳＡｋｉｔ，ＣＡＰｆｒｏｍｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｓａｍｐｌｅｓｗｈｉｃｈｗａｓｃｏｍｐｅｔｅｄｗｉｔｈＣＡＰ－ＨＲＰ，ａｎｄｃｏｕｌｄｂｅｃｏｍｂｉｎｅｄａｎｔｉｂｏｄｙｃｏａｔｅｄ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＣＡＰｃｏ

7、ｕｌｄｂｅｍｅａｓｕｒｅｄｂｙｃｏｌｏｒｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｓｕｂｓｔｒａｔｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄＨＲＰ．Ｔｈｅｌｉｍｉｔｏｆｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｉｎａｎｉｍａｌｐｒｏｄｕｃｔｓｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ０．１μｇ／ｋｇ，ａｎｄｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓｒａｎｇｅｄｆｒｏｍ７４．４％ｔｏ１０５．４％ｆｏｒｆｏｒｔｉｆｉｅｄｓａｍｐｌｅｓａｔｌｅｖｅｌｓｏｆ２０ｔｏ３００ｎｇ／ｋｇｗｉｔｈｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆｖａｒｉａｔｉｏｎｖａｌｕｅｓｌｅｓｓｔｈａｎ１５％．ＴｈｅＥＬＩＳＡｋｉｔｃｏｕｌｄｍｅｅｔｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｏｆｄｅ

8、ｔｅｃｔｉｎｇＣＡＰｒｅｓｉｄｕｅｉｎａｎｉｍａｌｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ；ＥＬ