Actinobacteria的分离与鉴别

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1、去除各多环芳烃产生的总有机碳。说明FCN1和FCN2转化蒽、菲、芘的酶也能作用于降解反应过程中生成的中间产物。曾有研究报道6,在30℃条件下降解蒽、菲、芘,利用所测出的各多环芳烃的浓度计算它们的去除率时,认为因挥发引起多环芳烃浓度的降低可忽略不计。事实上蒽、菲、芘是不易挥发的。所以,在我们的实验中,25℃条件下,各多环芳烃浓度及TOC值的降低应该是微生物降解转化的结果。在实验过程中,反应瓶中液体逐渐由原来不透明的乳白色(不溶性的多环芳烃引起的)变为淡黄色的透明液体,并有大量微生物絮体出现,按照活性污泥培养过程中的经验,絮体的出现说明两株黄杆菌在蒽、菲、芘中繁

2、殖生长。3结论本研究分离出两株黄杆菌FCN1和FCN2,它们对蒽、菲、芘均有降解效能,但对蒽的降解效果最好。Fe3+与Mg2+的加入对FCN1降解菲有促进作用。FCN1和FCN2在降解转化蒽、菲、芘的同时,也能将反应过程中产生的中间产物逐步转化去除。参考文献1SaeedT,Al2BloushiA,AlMatroukK.ArchivesofEnvironmentalContaminationandToxicity,1995,29:45～51.2WilliamTS,MichaelDA.ApplEnvironMicrobiol,1995,61:357～362.3陆

3、军,王菊思,赵丽辉,等.环境科学,1996,17:1～44ZhongbaoLiu,AnnetteMJ,RichardGL.ApplMicrobiol,1995,61:145～151.5IliaYJ,RichardB.ApplEnvironMicrobiol,1996,62:2311～2316.6JeromeFJ,ChikashiS,RaulC.WaterEnvironRes,1998,70:356～361.Actinobacteria的分离与鉴别余利岩姚天爵(中国协和医科大学中国医学科学院医药生物技术研究所北京100050)摘要:Actinobacteria

4、classisnov.一般包括具有超过50%G+C的DNA碱基组成的微生物。实验中在分土培养基中,添加了Nalidixicacid及Aztreonam和Benlate,从4份土壤样品中,共分离得到64株细菌,革兰氏阳性细菌共计56株,占所分离菌株的8715%。任意挑选其中的革兰氏阳性细菌,选用以高G+C含量革兰氏阳性细菌为靶点的PHGC探针及PNHGC对照探针,并联合使用我们自行设计的适用于Actonobacteria的PA21和PA22探针进行初筛菌株的鉴别。综合4种探针的FISH的结果,我们可以判定在31株分离株中,有22株Acti2nobacteria

5、,6株低G+C含量革兰氏阳性细菌,其它3株则不易判定。DNAG+C含量的测定结果表明,所建立的FISH方法可作为鉴别Actinobacteria的一种手段,它具有完整、准确和直观的优点。关键词:Actinobacteria革兰氏阳性高G+C含量细菌,荧光原位杂交中图分类号:Q93文献标识码:A文章编号:025322654(2001)0520036206收稿日期:2000206202,修回日期:2000210230THEISOLATIONANDIDENTIFICATIONOFACTINOBACTERIAYULi2YanYAOTian2Jue(Institute

6、ofMedicinalBioechnology,ChineseAcademyofMedicalSciencesPekingUnionMedicalCollege,Beijing100050)Abstract:Thelineage2Actinobacteriaclassnov.comprisesorganismswithaDNAbasecompositionwhichgenerallyisabove50%G+C(withafewexceptions).WesetupamethodthathasbeenusedinisolatingActinobacteriaa

7、ndActinomycetes.Weadded25μg/mLNalidixicacidand25μg/mLAztreonamintoisolationmediatoinhibittheotherbacteriaand20μg/mLBenletetoinhibitfungi.Weusedfluorescentinsituhybridizationtoidenti1fyActinobacteria.Usingthefourprobes,PA21,PA22,PHGCandPNHGC,wemadetheidentificationonthe31strainsofth

8、e56gram2positivebacteriara