人脾脏巨噬细胞的分离与纯化

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1、第25卷第5期西安交通大学学报（医学版）7ol8259o852004年10月JournalofXi'anJiaotongUniversity（MedicalSciences）:ct82004◇技术方法◇人脾脏巨噬细胞的分离与纯化闫峰，李宗芳，张澍，杨建辉，李爱民，刘效恭（西安交通大学第二医院普外科，陕西西安710004）摘要：目的探索分离纯化大量人脾脏巨噬细胞（Mφ）的方法。方法选取10例手术切除的脾脏，机械研磨法获得脾脏组织细胞混悬液。采用贴壁培养的方法进行Mφ的分离与纯化，相差显微镜下动态观察，明确贴壁培养的合适时

2、间，详细记录Mφ分离纯化过程各步骤所需时间。收获的Mφ，台盼蓝染色判定活力并计数，统计出平均每克脾脏组织收获的Mφ数及其纯度。相差显微镜、透射电镜观察分离纯化Mφ的形态特征。结果分析贴壁培养各时间段的细胞纯度及活力，确定Mφ培养的合适时间为2～3h。贴壁培养纯化后，平均从每克脾脏组织可收获（0.25±0.03）8×10个Mφ，纯度为（90±5）%，细胞活力)99%，细胞结构及各种细胞器结构均完整。结论贴壁培养方法分离纯化人脾脏Mφ是成功可行的，收获的Mφ数量大、纯度高、活力好，为脾脏Mφ功能的深入研究奠定了基础。关键词

3、：脾脏；巨噬细胞；贴壁培养；分离方法中图分类号：R318.1文献标识码：A文章编号：1671-8259（2004）05-0513-04IsolationandpurificationofmacrophagesfromhumanspleenYanFeng，LiZongfang，ZhangShu，YangJianhui，LiAimin，LiuXiaogong（DepartmentofGeneralSurgery，SecondHospitalofXi’anJiaotongUniversity，Xi’an710004，Chin

4、a）ABSTRACT：Objective;odeveloodofisolatingandagesfro=>u=ansu=ansu=ansanicallygroundinculture=ediu=o

5、fCDMBE1640andfiltered8Macro<>agesAereisolatedandoringcultivation，andAereo?servedconsecutivelyunder<>aseEcontrast=icroscoeoile，t>eti=eneededduringeac>evia?ilityof

6、o<>agesAasassessedAit>tryeaverageyieldagesAerecalculated8Mor<>ologicalc>aracteristicsofisolated=acro<>agesAeredetected?y<>aseEcontrast=icroscoeoor

7、ingcultivationAas8confir=edto?e2～3>ours8;>eaverageyieldof=acro<>agesisolatedfres>lyAas（0825±0803）×10evia?ilityAasconstantly)99F8Gellstructureandorganelleultrastructureof=acro<>agesAereintact8ConcIusionHgreatnu=?erof=acro<>age

8、sAit>>ig>degreeofu=ansoringcultivation8;>isnovel=et>odofisolationand