妇科再造丸对中波紫外线照射所致豚鼠皮肤色素沉着的抑制作用

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时间:2019-05-24

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1、妇科再造丸对中波紫外线照射所致豚鼠皮肤色素沉着的抑制作用作者:张晴,罗俊,黄能慧【摘要】目的 研究妇科再造丸对皮肤色素沉着的作用,并探讨其部分作用机理。方法应用白色豚鼠经中波紫外线(UVB)照射诱导皮肤色素沉着动物模型,用HMB45为一抗,以免疫组化方法显示表皮中的黑色素细胞,检测黑色素细胞个数及其平均灰度值。结果妇科再造丸高、中、低3个剂量组与模型组比较,均能减少黑色素细胞个数并增加其平均灰度值(P<0.01)。结论妇科再造丸对黑色素细胞增殖有一定的抑制作用。【关键词】妇科再造丸;中波紫外线;色素沉着;黑色素细胞

2、Abstract:ObjectiveTostudytheinhibitoryeffectofFu-Ke-Zai-ZaoPillonpigmentationinducedbyUVBandinvestigateitsmechanism.MethodsThechangesofnumberandmeangradationofmelanocytesinducedbyUVBwereobservedintheexperimentalhypermelanosismodel(whiteguineapig).ResultsDecreased

3、numberandincreasedmeangradationofmelanocyteswerefoundinthreegroupsofFu-Ke-Zai-ZaoPillcomparedwithmodelgroup(P<0.01).ConclusionFu-Ke-Zai-ZaoPillcaninhibitmelanocyticproliferation,whichmaybemakeitvalidintreatingskinpigmentation.Keywords:Fu-Ke-Zai-ZaoPills;UVB;Pi

4、gmentation;Melanocyte皮肤色素沉着是临床常见疾病,发病人群广泛,尤其对于女性,在影响容貌的同时还会造成心理压力。其发病机制主要是由于皮肤中黑色素细胞增多、合成黑色素能力增强[1]。妇科再造丸为一复方中药制剂,由当归、熟地、白芍等四十余味中药材组成,临床应用已有几十年之久。本实验通过建立中波紫外线(UVB)诱导豚鼠皮肤色素沉着模型,观察了妇科再造丸对黑色素细胞的作用,旨在为该药的进一步开发利用提供科学的理论依据。1器材与方法1.1动物雌性白色豚鼠,体重(350±20)g,合格证号:SCXK(黔)2002

5、-0001,由贵阳医学院实验动物中心提供。1.2试剂妇科再造丸丸剂(2.6g/10丸,贵阳德昌祥制药有限公司产品,批号051126),维生素C(50mg/片,重庆天圣药业有限公司产品,批号050722),维生素E胶囊(100mg/个,广州白云山制药厂产品,批号060602),黑素瘤抗体(HMB45)试剂盒(天津市津脉基因测绘技术有限公司产品)。1.3仪器SS-01A型紫外线光疗仪〔光谱(312±10)nm,辐照强度3.2mW/cm2,上海希格玛高技术有限公司〕,Biomias99图像分析系统(四川大学图像图形研究所)。1

6、.4方法[2,3]豚鼠48只,按体重随机分为6组,每组8只:妇科再造丸高(1.96g·kg-1·d-1)、中(0.98g·kg-1·d-1)、低(0.49g·kg-1·d-1)3个剂量组,阳性对照组[4](维生素C0.085g·kg-1·d-1+维生素E0.03g·kg-1·d-1),正常对照组(蒸馏水6ml·kg-1·d-1)及模型组(蒸馏水6ml·kg-1·d-1)。除正常对照组外,其余5组用乌拉坦(0.4g·kg-1)腹腔注射麻醉,剪净背部中心被毛,使用紫外光疗仪照射每只豚鼠背部中心30min,照射总量达到5700

7、mJ/cm2。照射次日开始灌胃给药,连续3周。3周后处死动物,取豚鼠照射区域去毛皮肤一块(约1cm×2cm),正常组豚鼠取相应区域去毛皮肤一块,中性福尔马林固定。常规石蜡包埋切片,用黑素瘤鼠抗人单克隆抗体(HMB45)为一抗,采用免疫组化方法显示表皮中的黑色素细胞。1.5检测指标[5]光镜观察HMB45染色阳性的黑色素细胞密度及着色深浅,并通过Biomias99图象分析系统,检测切片上黑色素细胞个数及平均灰度值。采用Excel2003统计软件进行组间T-test分析。2结果2.1光镜观察正常对照组豚鼠表皮的基底层细胞间,

8、可见到较少的HMB45标记阳性的黑色素细胞,着色不是很深(见图1)。模型组HMB45标记阳性的黑色素细胞明显增多,成簇分布于表皮基底层细胞间,并且着色很深,呈强阳性反应(见图2)。妇科再造丸3个剂量组及阳性对照组中黑色素细胞数均有减少,着色变浅,其中以妇科再造丸高剂量组尤为明显,见图3。2.2对豚鼠皮肤中黑色素细胞个

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