牛塑料细管冷冻精液技术

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1、牛塑料细管冷冻精液技术牛塑料细管冷冻精液 1范围本标准规定了牛细管冻精液的质量标准、技术要求、检验规则。本标准适用于乳、肉、兼用牛及黄牛的冷冻精液产品（以下简称“冻精”）。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 3 引用标准下列标准中牛细管冻精质量标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准

2、出版时，所示版本均为有效。所示标准都会被修订，使用本标准的各方面应探讨使用下列标准最新版本的可能性。GB4143—84牛冷冻精液GB5458    液氮容器 4 定义与术语4.1 精子：公畜生殖器官之产物，用于母畜受精。4.2 射精量：通过公畜交配所采到的精液毫升数。4.3 精液：按照适合于精子保存和使用的技术方法，经稀释和处理的精子。4.4 剂量：经过检定，单份包装，一次授精所需的精液量。4.5 批量：在一天之内以一头公牛的一次或多次射精所采集到的并用同一种方法对精液进行处理的若干剂量的精液。4.6 精子密度（SpermConcentra

3、tion）：指每毫升精液中的精子数。4.7 精子活力（SpermActivityratepost-thaw）:指37℃下直线前进运动精子占总精子数的百分率。4.8 精子顶体完整率（Intactratespermarccosinepost-thaw）：指顶体完整精子占总精子数的百分率。4.9 精子崎型率（Abnormalspermratepost-thaw）：指崎型精子占总精子数的百分率。4.10 精子成活率（Spermsurvivalratepost-thaw）：指在37℃环境下保存4小时后直线前进运动精子占总精子数的百分率。4.11 细菌

4、数（BacteriaCount）：指一剂量冻精经培养后出现的细菌菌落数。 5 剂型：0.25ml塑料细管。 6 牛细管冷冻精液质量标准6.1 剂量：细管冻精：0.2±0.03mL。执行GB4143——84所列条款执行。6.2 活力：一剂量细管冻精解冻后的精液活力占35%（即0.35）以上。6.3 有效精子数：一剂量细管冻精解冻后的精液直线前进运动的精子数≥1×107。执行GB4143——84所列条款执行。6.4精子存活率：解冻后的细管精液37℃恒温箱中保存4小时检查活力，存活率≥1%（0.01）。6.5 精子顶体完整率≥40%。执行GB41

5、43——84所列条款执行。6.6 精子畸形率≤20%。执行GB4143——84所列条款执行。6.7 细菌菌落数≤1000个，解冻后的精液中无病源性微生物。无GB4143—84规定之各种传染性疫病。 7 检验规则及检查技术要点：7.1 检验规则7.1.1 每头公牛每批号的冻精必须有站质检人员检验合格才可准许发放，出售。7.1.2 出站前的每批冻精其外观、精子活力每头牛每批号的产品都必须检验。7.1.3 本标准技术要求中的全部项目，每头牛每月至少抽检一个批号产品。6.1.4 剂型检验应在每头牛每批号冻精产品中随即抽取，每个检验项目按三份检查。7

6、.1.5 检样结果以抽检的三份样品的平均值为准。7.1.6 产品检验过程中任何一项技术要求不合格则判定为不合格产品。7.2 检查技术要点7.2.1 外观7.2.1.1 技术要点：细管无裂痕，两端封口严密，印制的标识应清晰。细管壁上必须注明生产单位、品种代码、公牛号、生产日期。7.2.2 活力7.2.2.1 技术要点；7.2.2.2解冻：细管冻精从液氮罐中迅速取出后投入到38℃—40℃水浴中快速摆动10—15秒钟，取出后借助手温搓动数下待检（输精时剪下封口端装枪）。7.2.2.3检查：取解冻后精液50μl（微升）置于载玻片上，加盖玻片立即在2

7、00—400倍显微镜下观察活力。环境温度或载物台温度保持在34℃—38℃；也可通过电视显微装置在荧光屏观察活力。每个样品观察3个视野，注意观查不同液层内的精子运动状态，进行全面评定。评定标准以百分制为主。（既35%的冻精活力可标记为0.35）7.2.3有效精子数7.2.3.1技术要点：检查方法：细管精液用血色素管准确吸取20微升解冻精液，注入盛有0.98ml的3.0%氯化钠溶液的试管内，混匀，使之成为100倍稀释的稀释精液。将准备好的血球计数板用血盖片将计数室盖好，用小细管吸取一滴稀释精液于血盖片边缘，使精液自行流入计数室，均匀充满，不能有

8、气泡或厚度过大，然后在显微镜或电视荧光屏上观察计数。7.2.3.2 计算公式：A 每剂量中精子数=5个中方格精子数×250×剂量数。B 每样品观察上下两个计数室，取平均值。如两个