GB4789.4-1994 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验.pdf

《GB4789.4-1994 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、GB4789.4—1994中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验MicrobiclogiclexaminationoffoodhygieneExaminationofSalmonellaGB4789.4—19941主题内容与适用范围本标准规定了食品中沙门氏菌的检验方法。本标准适用于食品微生物学中毒样品中沙门氏菌的检验。2引用标准GB4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3设备和材料3．1天平：称取检样用。3．2均质器或乳钵。3．3温箱：36±1℃，42℃。3．4显微镜。3．5灭菌

2、广口瓶：500mL。3．6灭菌三角烧瓶：500mL，250mL。3．7灭菌吸管：10mL。3．8灭菌平皿：90mm×15mm。3．9灭菌小试管：内径3mm，长5cm。3．10灭菌毛细管。3．11橡皮乳头。3．12载玻片。3．13酒精灯。3．14灭菌金属匙或玻璃棒。3．15接种棒、镍铬丝。3．16试管架、试管篓。4培养基和试剂4．1缓冲蛋白胨水（BP）：按GB4789.28中4.12规定。4．2氯化镁孔雀绿（MM）增菌液：按GB4789.28中4.13规定。4．3四硫酸钠煌绿（TTB）增菌液：按GB4789.28

3、中4.13规定。4．4亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液：按GB4789.28中4.16规定。4．5亚硫酸铋琼脂（BS）：按GB4789.28中4.19规定。4．6DHL琼脂：按GB4789.28中4.20规定。4．7HE琼脂：按GB4789.28中4.21规定。4．8WS琼脂：按GB4789.28中4.23规定。4．9SS琼脂：按GB4789.28中4.22规定。4．10三糖铁琼脂：按GB4789.28中4.26，4.27规定。中华人民共和国卫生部1994—03—18批准1994—09—01.www.bzxzk.c

4、om.GB4789.4—19944．11蛋白胨水、靛基质试剂：按GB4789.28中3.13规定。4．12尿素琼脂（pH7.2）：按GB4789.28中3.15规定。4．13氰化钾（KCN）培养基：按GB4789.28中3.16规定。4．14氨基酸脱羧酶试验培养基：按GB4789.28中3.12规定。4．15糖发酵管：按GB4789.28中3.2规定。4．16ONPG培养基：按GB4789.28中3.3规定。4．17半固体琼脂：按GB4789.28中4.30规定。4．18丙二酸钠培养基：按GB4789.28中3

5、.7规定。4．19沙门氏菌因子血清：按26种用于初步分型；57种用于进一步分型；163种用于详细分型。5检验程序沙门氏菌检验程序如下：6操作步骤6．1前增菌和增菌冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品均应经过前增菌。各称取检样25g，加在装有225mL绘冲蛋白胨水的500mL广口瓶内。固体食品可先应用均质器以8000～10000r/min打碎1min，或用乳钵加灭菌砂磨碎，粉状食品用灭菌匙或玻棒研磨使乳化，于36±1℃培养4h（干蛋品培养18～24h），移取10mL，转种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌

6、液内，于42℃培养18～24h。同时，另取10mL，转种于100mL亚硒酸盐胱氨酸增菌液内，于36±1℃培养18～24h。鲜肉、鲜蛋、鲜乳或其他未经加工的食品不必经过前增菌。各取25g（25mL）加入灭菌生理盐水25mL，按前法做成检样匀液；取种于100mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫磺酸钠煌绿增菌液内，于42℃培养24h；另取25mL接种于100mL亚硒酸盐胱增菌液内，于36±1℃培养18～24h。6．2分离取增菌液1环，划线接种于一个亚硫酸铋琼脂平板和一个EHL琼脂平板9或HE琼脂平板、WS或SS琼脂平板）。两

7、种增菌液可同时划线接种在同一个平板上。于36±1℃分别培养18～24h（DHL、HE、WS、SS）或40～48h（BS），观察各个平板上生长的菌落，沙门氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ和沙门氏菌Ⅲ硌个平板上的菌落特征见表1。中华人民共和国卫生部1994—03—18批准1994—09—01.www.bzxzk.com.GB4789.4—1994表1沙门氏菌属各群在各种选择性琼脂平板上的菌落特征选择性琼脂平板沙门氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ沙门氏菌Ⅲ（即亚利桑那菌）亚硫酸铋琼脂产硫化氢菌落为黑色有金属光黑色有金属光泽泽、棕褐色或灰

8、色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些菌株不产生硫化氢，形成灰绿色的菌落，周围培养基不变DHL琼脂无色半透明：产硫化氢菌落中乳糖迟缓阳性或阴性的菌株心带黑色或几乎全黑色与沙门氏菌Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同；乳糖阳性的菌株为粉红色，中心带黑色HE琼脂蓝绿色或蓝色，多数菌株产硫乳糖阳性的菌株为黄色，中WS琼脂化氢，菌落中心黑色或几乎全心黑色或几乎全黑色；乳糖黑色迟缓阳性或阴性的菌株为蓝绿色或蓝