工业微生物实验指导书

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1、工业微生物实验指导书邓年方编贺州学院生物技术实验室2008年5月PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn1目录实验一用阿须贝氏培养基分离好氧性自生固氮菌..............................................2实验二从泡菜中分离乳酸菌................................................................................3实验三水中细菌总数的测定...

2、............................................................................4实验四酸奶的制作..............................................................................................5实验五甜酒酿的制作..................................................................

3、......................6实验六乙醇发酵实验..........................................................................................7实验七单细胞蛋白的生产................................................................................10PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.finepri

4、nt.cn2实验一用阿须贝氏培养基分离好氧性自生固氮菌一、实验目的1．通过对好氧性自生固氮菌的分离，加深理解选择性培养的原理和应用。2．熟悉从自然样品中分离微生物的具体操作方法。二、实验原理选择性培养是一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养，具有使混合菌中的劣势发展成优势菌的功能，故被广泛用于菌种筛选等领域。阿须贝氏（Ashby）无氮培养基是一种缺之结合态无机或有机氮源的培养基，可有效从土壤中分离自生固氮菌。其选择的原理是自生固氮菌在保证碳源（甘露醇或葡萄糖）和无机营养供应

5、的情况下，可利用空气中的游离氮合成自身需要的含氮有机物，而其他各类微生物多无自生固氮能力，因此达到了选择性富集的效果。三、实验材料和器皿1.培养基：阿须贝氏无氮培养基甘露醇10g，KH2PO40.2g，NaCl0.2g，CaSO4•2H2O0.1g，CaCO35g，蒸馏水1000ml，琼脂粉8g，pH7.2—7.4。2.器皿：无菌培养皿，无菌吸管，研钵，接种环，三角瓶，载玻片等。3.其他：表土样本，无菌水等。四、实验方法1.采集土样：用小铲铲取稍干的10cm深和20cm深的土壤样品约1克，适当研碎；2.准

6、备平板：将阿须贝氏培养基加热融化，待冷至50℃左右倒数个平板，冷却待用；3.纸板布土：将土样倒在约15cm×15cm大小的毛面硬纸板上，摇动几下，轻轻倒去颗粒较大的土样；4.弹土接种：把纸板沾土的面朝向平板并盖上,随即用手轻轻弹数下.然后移去纸盖上皿盖；PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn35.保温培养：将培养皿平板倒置后放入28℃恒温中培养4-7d；6.观察菌落：凡出现大型、黏稠、半透明，颜色呈白色、褐色或黑褐色的菌落，一般都是好氧性固氮菌。7.分离纯

7、种：可用平板划线分离法进行菌种纯化。实验二从泡菜中分离乳酸菌一、实验目的掌握从泡菜中分离有关乳酸菌的方法。二、实验原理乳酸菌都是一些兼厌氧菌，革兰氏阳性，杆状或球状，无芽孢，不运动，分解和合成能力较差，营养要求较高，需提供丰富的肽类、氨基酸和维生素，它们缺乏呼吸链成分、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，在琼脂培养基表面或内层只形成较小的白色或淡色菌落。常用的分离培养基有番茄汁碳酸钙琼脂培养基、麦芽汁碳酸钙琼脂培养基。分离方法有平板划线法或经适当稀释后进行涂布平板法。三、实验材料和器皿1.培养基：番茄汁碳酸钙琼脂

8、培养基葡萄糖10g，酵母膏7.5g，KH2PO42g，吐温800.5ml，琼脂20g，番茄汁100ml，自来水900ml，Ph7.0。2.器皿：无菌培养皿，无菌吸管，研钵，接种环，三角瓶，载玻片等。3.其他：泡菜汁，无菌水等。四、实验方法1.配制番茄汁碳酸钙琼脂培养基，倒平皿，凝固后待用；2.平板分离：将优质的泡菜汁通过直接平板划线法或经适当稀释后进行涂布平板法分离出单菌落；3.恒温培养：将上述平板分别放入25℃、37℃温箱培