粪大肠菌的测定

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1、本电子版为发布稿。请以中国环境科学出版社出版的正式标准文本为准。HJ中华人民共和国环境保护行业标准HJ/T347─2007水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法（试行）Waterquality—Determinationoffecalcoliform—manifoldzymotechnicsandfiltermembrane（发布稿）2007-03-10发布2007-05-01实施国家环境保护总局发布IHJ/T347—2007目次前言………………………………………………………………………………………

2、…………Ⅱ第一篇多管发酵法1适用范围………………………………………………………………………………………12原理……………………………………………………………………………………………13培养基和试剂…………………………………………………………………………………14步骤……………………………………………………………………………………………25结果的计算……………………………………………………………………………………2第二篇滤膜法1适用范围………………………………………………………………………………………

3、42原理……………………………………………………………………………………………43培养基和试剂…………………………………………………………………………………44步骤……………………………………………………………………………………………55结果的计算……………………………………………………………………………………6I前言为规划《地表水环境质量标准》（GB3838-2002）的实施工作，制定本试行标准。本标准规定了地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的多管发酵法和滤膜法。本标准适用于地表水、地下水及废水中粪

4、大肠菌群的测定。本标准为首次制订。本标准由国家环境保护总局科技标准司提出。本标准由国家环境保护总局水和废水监测分析方法编委会组织中国环境监测总站等单位起草。本标准国家环境保护总局2007年3月10日批准。本标准自2007年5月1日起实施。本标准由国家环境保护总局解释。II水质粪大肠菌群的测定粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分，主要来自粪便。在44.5℃温度下能生长并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。用提高培养温度的方法，造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件，使培养出来的菌主要为来自粪便中

5、的大肠菌群，从而更准确地反映出水质受粪便污染的情况。粪大肠菌群的测定可以用多管发酵法和滤膜法。第一篇多管发酵法1适用范围本标准适用于地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。2原理多管发酵法是以最可能数（mostprobablenumber）简称MPN来表示试验结果的。实际上它是根据统计学理论，估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。如果从理论上考虑，并且进行大量的重复检定，可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管重复数目增加，这种差异便会减少，对于细菌含量的估计值，大部分取

6、决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。因此在实验设计上，水样检验所要求重复的数目，要根据所要求数据的准确度而定。3培养基和试剂本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水。3.1单倍乳糖蛋白胨培养液：成分：蛋白胨10g牛肉浸膏3g乳糖5g氯化钠5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL蒸馏水1000mL制法：将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中，调节pH为7.2～7.4，再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL，充分混匀，分装于含有倒置的小玻

7、璃管的试管中，于高压蒸汽灭菌器中，在115℃灭菌20min，贮存于暗处备用。3.2三倍乳糖蛋白胨培养液：按上述配方比例三倍（除蒸馏水外），配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液，制法同上。13.3EC培养液：成分：胰胨20g乳糖5g胆盐三号1.5g磷酸氢二钾（K2HPO4）4g磷酸二氢钾（KH2PO4）1.5g氯化钠5g蒸馏水1000mL制法：将上述成分加热溶解，然后分装于含有玻璃倒管的试管中。置高压蒸汽灭菌器中，115℃灭菌20min。灭菌后pH应为6.9。3.4培养基的存放在密封瓶中的脱水培养基成品要存

8、放在大气湿度低、温度低于30℃的暗处，存放时应避免阳光直接照射，并且要避免杂菌侵入和液体蒸发。当培养液颜色变化，或体积变化明显时废弃不用。4步骤4.1水样接种量将水样充分混匀后，根据水样污染的程度确定水样接种量。每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。相对未受污染的水样接种量为10mL、1mL、0.1mL。受污染水样接种量根据污染程度接种1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。使用的水样量可参考下表1。表1接种