课题84：动物的细胞培养与体细胞克隆

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1、课题84：动物的细胞培养与体细胞克隆厦门市海沧中学刘文胜【课标要求】简述动物的细胞培养与体细胞克隆（知I—I—I）。【教学要求】1.能简述动物细胞培养的含义；2.能说出动物细胞培养的所需条件；3.能简述动物细胞培养的基本程序；4.能简述动物细胞核移植的概念；5.能列举某一克隆动物的产生，简述动物细胞核移植的程序；6.收集通过动物细胞核移植进行克隆的实例；7.能举例说出动物细胞培养与动物细胞核移植的应用和发展前景。【考点梳理】一、动物细胞的培养和克隆（一）动物细胞的培养1、含义：从动物体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞的悬浮液，然后，在人工控制的培养条件下

2、，使这些细胞得以生存，并保持生长、分裂（繁殖）乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡性能等生命活动的现象。2、过程（如图）。3、传代培养的原因：培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。4、相关概念（1）原代培养：从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。（2）传代培养：将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶的培养。（3）细胞系：泛指可连续传代的细胞。（4）细胞株：通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞。细胞株一般具有恒定的染色体组型、同功酶类型、病毒敏感性和生化特性等。（二）细胞克隆1、概念：把一个单细胞从群体中分离出来

3、单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。2、最基本要求：保证所建成的克隆来源于单个细胞。3、提高细胞克隆形成率的措施（1）选择适宜的培养基；（2）添加适宜的培养基；（3）以滋养细胞支持生长；（4）激素刺激；（5）使用CO2培养箱调节pH。二、动物的克隆繁殖（一）动物细胞全能性的表现程度：不同细胞全能性的表现程度不同，如：受精卵＞胚胎干细胞＞多能干细胞＞单能干细胞＞体细胞。（二）动物细胞核的移植技术项目细胞核的移植概念利用一个细胞的细胞核（供体核）来取代另一个细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子”原理动物体细胞核具有全能性过程意义①有利于遗传疾病的治疗，优

4、良品种的培育②对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义③降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率【基础训练】1、某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量多。（2）细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液pH。（3）药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细

5、胞比乙细胞可以传代的次数更多。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用胰蛋白酶（胰酶）消化处理。（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素。（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入一定量的药物Y溶液，B组细胞培养液中加入等量的无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的mRNA或蛋白质合成水平的差异，确定抗肿瘤药物Y的药效。2、（2007宁夏理综32B）现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组

6、成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。（1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞中取出细胞核注入B品种牛的去核卵母细胞，经过某些刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为重组胚胎，将该胚胎移入代孕母牛的子宫中，通过培育可达到目的。（2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量不足，为解决这一问题，可以用促性腺激素处理B品种母牛。（3）克隆牛的产生说明动物体细胞核具有全能性。克隆牛的性状主要表现A品种牛的特征。由A、B两品种杂交得

7、到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自两个亲本，细胞质来自雌性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成不同（相同，不同）。3、（2007江苏生物29）动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有（）A、正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B、有无血清对正常细胞培养的影响不同C、培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D、培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大BCD