化学发光适体传感器在食品污染物检测中的应用研究

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1、分类号：密级：ＵＤＣ：学号：４０７４３１３１５０２２南昌大学硕士研究生学位论文化学发光适体传感器在食品污染物检测中的应用研究ＲｅｓｅａｒｃｈｏｆＡｌｉｃａｔｉｏｎｉｎＣｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔＡｔａｓｅｎｓｏｒｓｉｎＦｏｏｄｐｐｐＣｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎＤｅｔｅｃｔｉｏｎ李素培养单位（院、系）：资源环境与化工学院指导教师姓名、职称：严喜鸾副教授＾申请学位的学科门类：工学学科专业名称：化学工程与技术论文答辩日期：２０１８年月日答辩委员会主席＿评阅人：２０１８年月日

2、摘要摘要食品污染物严重的威胁着人类的身体健康，同时食品安全问题也引起了越来越多的关注，对食品污染物的检测是十分必要的，寻找更灵敏、更快捷、更方便的食品污染物检测方法是迫在眉睫的事情。本文构建适体传感器利用化学发光法检测食品中的污染物。主要检测的物质是食品中的真菌毒素赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)、食品中残留的抗生素氯霉素(Chloramphenicol，CAP)以及食品中污染细菌体内的三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate，ATP)。(1)高效液相色谱法结合荧光检测器检测OTA主要利用高效液相色谱法结合荧光检测器(HPL

3、C-FLD)检测OTA，首先用HPLC面积归一化法对OTA的标准品建立峰面积（µV）与OTA浓度的标准曲线，通过C18固相萃取小柱对经过前处理啤酒中加标OTA样品进行纯化提取，进行回收率实验。结果表明：峰面积和OTA浓度呈现良好的线性关系，最低检测限为0.1ng/mL，平均的回收率在98.3%~102.1%之间，具有良好的精密度和灵敏度。(2)金标记羟胺放大化学发光检测OTA利用纳米金催化鲁米诺化学发光体系起到增强化学发光信号的作用，建立纳米金-适体生物传感器，以及NH2OH/HAuCl4对传感器具有放大作用，从而对OTA进行间接的定量检测。在优化的条件

4、下，建立化学发光值和OTA浓度的标准曲线，同时对生物传感器进行了特异性考察，最后将生物传感器用来检测加标啤酒和谷物玉米中的OTA。结果表明：化学发光值(△CL)和OTA浓度呈现良-3好的线性关系，最低检测限为1.58×10ng/mL，而且生物传感器的特异性强，平均的回收率在95.9%~107.7%之间。相比第二章的HPLC法检测OTA，本实验方法的线性范围和最低检测限都优于HPLC，且本实验方法中实际的食品样品前处理比较简单，节约了大量的时间和成本。(3)基于适体传感器无标记化学发光同时检测ATP和CAP本实验利用羧基磁性微球和羧基聚苯乙烯微球建立ATP

5、/CAP适体传感器，用于ATP/CAP混合物的检测。同时对ATP/CAP适体传感器进行了特异性考察，最后将ATP/CAP适体传感器应用于加标牛奶和啤酒中的ATP和CAP检测。结果表明：化学发光值(△CL)和ATP和CAP浓度都呈现良好的线性关系，ATP和I摘要-8-8CAP的最低检测限为3.76×10mol/L和2.48×10mol/L。本方法对ATP和CAP具有较强的特异性，平均加标回收率在95.1%~106.3%之间。关键词：食品污染物；纳米金；适体传感器；化学发光IIAbstractAbstractThefoodcontaminantshavese

6、riousthreatentohumanhealth,atthesametime,foodsafetyissueshavegotmoreandmoreattention.Itisnecessarytodetectthefoodcontaminants.Findingmoresensitive,faster,andmoreconvenientdetectionmethodsoffoodcontaminantsisanimminenttask.Wedesignedtheaptasensorsfordetectionoffoodcontaminantsbych

7、emiluminescence(CL).ThemaindetectedsubstanceisOchratoxinA(OTA)whichisamycotoxininfood,Chloramphenicol(CAP),whichisaresidualantibioticinfood,andAdenosinetriphosphate(ATP)whichisinthevivoofcontaminatedbacteriainfood.(1)HighPerformanceLiquidChromatographywithFluorescenceDetectorford

8、etectingOTAInthispart,wedetectedOTAbyHig