实验室检(监)测在健康养殖中的应用

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1、实验室检（监）测在健康养殖中的应用王恩峰2015年2月病料采集及运输的要求报认识检测的目的和意义告如何开展检测工作内容、、血清学检测在疾病防控中的应用检测报告实例解读病料采集及运输的要求1、病料组织ü全面：脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结、扁桃体，肠道与脑单独保存ü伪狂犬必须有脑，最好是小脑ü药敏及细菌分离禁止冷冻病料ü病理切片现场固定，避免组织自溶，2-3cmü切记病料不要太大，尤其肝肺，选病变明显部位ü各样品间不要污染，做好标记ü流产胎儿带脐带，特别是日龄小的ü有客户自己解剖，喉头不是扁桃体，注意区分2、血液ü前腔静脉（小猪）

2、或耳缘静脉（大猪）采血2-3ml，斜面放置待血液凝固后尽快送检ü冷藏不冷冻，送检时切勿剧烈震荡血样，溶血、腐败ü编号清晰，注明猪群类别及检测项目ü尽量附免疫程序，便于分析ü如果运输路途较远，血液凝固析出血清后，收集血清送检，送检时在箱内放冰袋或冰冻矿泉水瓶。3、水样ü无菌取500ml水后放至灭菌玻璃瓶或刚开封的矿泉水瓶（倒掉矿泉水）中，送检时在箱内放冰袋。4、饲料或饲料原料ü取有代表性样品，放入样品袋或牛皮纸袋中直接送检。认识检测的目的和意义限制养猪生产水平进一步提升的关键因素：ü缺乏持续维护猪群健康的系统科学手段；ü普遍

3、带毒生产，对疾病的净化缺乏科学的认识；üPRRS的不稳定是最大的健康制约因素；ü实验室建了不少，但对实验室检测的重视只是在口头，缺少真正将实验室工作与生产紧密结合的策略研究和人才。3实验室检测的目的ü正确引种检测；ü评估免疫效果；ü制定免疫程序；ü临床疾病诊断；ü疾病风险预警；ü重要疾病净化；ü协助健康管理。病原学、血清学的检测技术（1）可以真实获取猪只健康状态、感染、免疫、发生疫病等方面阶段性的准确信息；（2）所获信息具有特殊的意义：ü血液内部信息的变化是动态的，血液循环是生命机体最重要的缓冲体系，动物机体的任何生理变化

4、都会通过血液客观、准确的反映出来；ü信息的实时性和前置性；（3）可以数字化阅读，进行定性定量的分析。疾病控制感染动物健康动物疾病控制亚健康亚健康感染动物健康动物在引入前进行检测，发现风险动物健康动物引进安全无风险的猪只风险动物健康动物确保有效免疫，以防疏漏健康动物猪病监控是规模化猪场管理中最关键的环节采样检测分析策略如何开展检测工作1.检测的目的要明确2.正确合理的采样3.准确的ELISA操作4.准确解释检测结果5.制定净化或清除计划1.检测的目的要明确A.评估疫苗免疫方案的效果B.预测接种时间:母源抗体存在下测定免疫最佳

5、时机C.分析猪场存在的疫病风险D.进行引种检测和策略性的措施E.制定控制和根除猪病方案1.检测的目的要明确A.评估疫苗免疫的效果ü弱毒疫苗免疫后4-6周采样，常见疫苗有：猪瘟，猪伪狂犬，猪蓝耳病等；ü灭活疫苗免疫后6-8周采样，常见疫苗有：猪口蹄疫，猪传染性胸膜肺炎，猪喘气病等。1.检测的目的要明确B.预测接种时间:母源抗体存在下测定免疫最佳时机ü母源抗体不能通过胎盘屏障,只能通过初乳(所以子猪母源抗体水平不均匀)；ü母源抗体对弱毒疫苗的免疫起明显的干扰作用；ü一般情况下母源抗体可维持到4-5周,PRVMab可能维持到8-

6、10周。例：猪瘟疫苗首免日龄的选择1.检测的目的要明确C.分析猪场存在的疫病风险1.检测的目的要明确D.进行引种检测和策略性的措施ü引种最大的风险是造成疾病的爆发üPRRSV易变特性导致不同猪场病原学上的差异üCSF/PR/PRRS抗原/抗体检测是必不可少的步骤1.检测的目的要明确E.制定控制和根除猪病方案ü当感染率低于一定比例,如猪瘟野毒/猪伪狂犬病感染率在1%/10%以下时,控制策率可转入根除策略。ü在目前国内情况下,猪蓝耳病根除(和维持阴性群)的工作相当困难，所以大部分场采用控制策略。2.正确合理的采样普查原则:ü针

7、对猪场所关注的或区域流行严重的疾病ü依据“群”的概念抽样ü群内猪只所涵盖的特性:胎龄结构,周龄ü群体数量少于30头的建议全群采样ü普查频率:至少2次/年2.正确合理的采样“群”的概念:ü公猪群(正在配种和暂停使用的公猪)ü后备群(引进或本场留种的公猪和母猪)ü怀孕母猪群(配种后-分娩前母猪)ü分娩后母猪群(含断奶后配种间隙母猪)ü产房乳猪群(断奶前乳猪)ü保育猪群(4-10周龄仔猪)ü育肥猪群(11-25周左右)血清学检测在疾病防控中的应用一、CSFV检测CSFV与BVDV是病毒中最为类似的两种病毒，所以猪瘟抗体ELISA

8、试剂盒要与BVDV无交叉反应BVDV：牛病毒性腹泻病毒（孙龙飞）üBVDV可以造成猪瘟检测的假阳性（IDEXX无交叉反应）ü从猪群中分离到BVDV病毒证实了猪群存在感染üBVDV在猪群中可以引起类似猪瘟的症状和病变监测用途：ü母源抗体的监控，确定首免日龄ü评估免疫后抗体水平ü免疫程序评估及调整1、引种检